丙肝病毒陽(yáng)性病人Notch信號(hào)分子和相關(guān)因子在單個(gè)核細(xì)胞及血清中的水平.pdf

1、目的:丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)是引起輸血后非甲非乙型肝炎的主要致病因子，給全球帶來(lái)了嚴(yán)重的醫(yī)學(xué)、社會(huì)和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。全世界約有1.7億人口感染了丙肝病毒并引起了多種臨床癥狀，其中約有一半以上的急性感染者轉(zhuǎn)為慢，進(jìn)而發(fā)展為肝硬化和肝細(xì)胞性肝癌。
　　HCV為單股正鏈RNA病毒。肝臟疾病發(fā)展過(guò)程中HCV和宿主之間出現(xiàn)了復(fù)雜的相互作用，免疫應(yīng)答介導(dǎo)了肝臟的炎癥性疾病。HCV與宿主的相互作用中，大量免疫細(xì)胞和

2、免疫相關(guān)分子，如淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、干擾素等細(xì)胞因子和共刺激分子等均發(fā)揮了重要作用，介導(dǎo)了機(jī)體對(duì)HCV的免疫應(yīng)答。
　　Notch信號(hào)通路是一條影響細(xì)胞命運(yùn)的、保守而重要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，幾乎涉及所有細(xì)胞的增殖和分化活動(dòng)，在調(diào)節(jié)細(xì)胞分化，增殖和凋亡，及一系列生理、病理過(guò)程中都起重要作用。
　　本研究旨在研究Notch配體和受體、靶基因以及相關(guān)的細(xì)胞因子在丙肝病毒陽(yáng)性患者外周血中的變化。
　　方法:
　　1.收集河北

3、醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院丙肝病毒陽(yáng)性患者30名為實(shí)驗(yàn)組，正常人30名為對(duì)照組。
　　實(shí)驗(yàn)組患者收集標(biāo)準(zhǔn):
　　(1)患者僅為慢性丙型肝炎，排除甲型肝炎、乙型肝炎和戊型肝炎。
　　(2)排除梅毒密螺旋體特異性抗體陽(yáng)性患者。
　　(3)排除HIV感染患者和其他感染的情況（如感冒等），因?yàn)檫@些感染的情況可能會(huì)導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果的升高。
　　(4)排除自身免疫性疾病患者。
　　2.收集實(shí)驗(yàn)組和正常對(duì)照組的新鮮空腹抗凝血，提

4、取單個(gè)核細(xì)胞的基因組RNA，反轉(zhuǎn)錄為cDNA，應(yīng)用實(shí)時(shí)定量RT-PCR檢測(cè)Notch受體、配體和靶基因，Th1/Th2/Th17型細(xì)胞因子(IFN-γ、 IL-4、IL-17)和趨化因子RANTES。
　　3.收集實(shí)驗(yàn)組和正常對(duì)照組的血清，用ELISA檢測(cè)細(xì)胞因子IL-17、IFN-α。
　　結(jié)果:
　　1.實(shí)驗(yàn)組的Notch1、Notch2、IFN-α、IFN-γ、IL-10、IL-17、IL-17F、Hes-1、R

5、ANTES、DLL-4、IL-6和Jagged-1的RT-PCR檢測(cè)結(jié)果與正常對(duì)照結(jié)果均有顯著性差異(P＜0.05)。
　　2.IFN-α和IL-17的ELISA分析結(jié)果顯示:實(shí)驗(yàn)組顯著高于正常組(P＜0.05)。
　　結(jié)論:丙肝病毒陽(yáng)性患者外周血中的Notch1和Notch2受體，DLL-4和Jagged-1兩種配體，Notch靶基因Hes-1，Th1型細(xì)胞因子IFN-γ，Th2型細(xì)胞因子IL-4和IL-10，Th17型細(xì)