胞質(zhì)模式識(shí)別受體和炎癥細(xì)胞因子在慢性乙型肝炎患者外周血單個(gè)核細(xì)胞和血清中的水平.pdf

1、目的:目前全世界約有3.5億慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)感染者，約占全球人口的6％，我國(guó)作為乙肝的多發(fā)流行區(qū)，占全球HBV表面抗原總攜帶率的近50％，且60％的人受過(guò)HBV的感染[1]。慢性乙型肝炎是由HBV感染而致病的炎癥性疾病。病發(fā)時(shí)，機(jī)體內(nèi)骨髓、肝臟、淋巴結(jié)和脾臟中的巨噬細(xì)胞含量增高，淋巴組織中的B淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞增殖分化，這些免疫細(xì)胞釋放趨化因子和細(xì)胞因子，在抗病毒的同時(shí)造成局部長(zhǎng)期的炎癥反

2、應(yīng)，由此可見炎癥性的免疫細(xì)胞、趨化因子和細(xì)胞因子在乙型肝炎的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用。
　　天然免疫系統(tǒng)要依賴模式識(shí)別受體識(shí)別入侵的外源病原微生物，然后將其清除掉。哺乳動(dòng)物主要具有兩類微生物識(shí)別系統(tǒng)，一類是膜結(jié)合受體，如Toll樣受體[2]，存在于細(xì)胞膜和細(xì)胞器室膜上，識(shí)別胞外微生物，然后活化細(xì)胞內(nèi)信號(hào)來(lái)激發(fā)機(jī)體的免疫反應(yīng);另一類是細(xì)胞質(zhì)中的模式識(shí)別受體，包括NOD樣受體和具有螺旋酶結(jié)構(gòu)域的抗病毒蛋白R(shí)IG-1和MDA5，在

3、病毒感染過(guò)程中，這些分子可識(shí)別病毒的DNA或RNA，在機(jī)體抗病毒的免疫應(yīng)答中發(fā)揮著十分重要的作用。本研究旨在考察表達(dá)在細(xì)胞質(zhì)中模式識(shí)別受體(NOD1、NOD2、RIG1、MDA5)、Ⅰ型干擾素及促炎癥細(xì)胞因子和趨化因子等在慢性乙型肝炎患者外周血單個(gè)核細(xì)胞和血清中的表達(dá)情況。
　　方法:
　　1收集2012年11月-2014年1月之間來(lái)河北省衡水市哈勵(lì)遜國(guó)際和平醫(yī)院就診的慢性乙型肝炎患者為實(shí)驗(yàn)組，共計(jì)34例，收集健康人40例為

4、實(shí)驗(yàn)對(duì)照組。
　　2采集實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的新鮮空腹抗凝血，分離單個(gè)核細(xì)胞，提取單個(gè)核細(xì)胞中RNA，并反轉(zhuǎn)錄為cDNA，應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)檢測(cè)NOD1、NOD2、 RIG1、MDA5、IFN-α、IFN-β、IL-8、IL-6、IRF-7、CXCL1和CXCL2的mRNA水平。
　　收集實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的血清，采用ELISA法測(cè)定IL-17和IFN-α的蛋白質(zhì)含量。
　　結(jié)果:與正常對(duì)照組比較，實(shí)驗(yàn)組的NOD1、NOD2

5、、RIG1、MDA5、IRF-7、IFN-α、IFN-β、IL-8、IL-6、CXCL1、CXCL2的mRNA水平均明顯升高，具有顯著性差異，P＜0.05。其中IFN-β的mRNA平均表達(dá)量為正常對(duì)照組的596倍，IFN-α、CXCL2、IRF-7和NOD1四項(xiàng)的mRNA表達(dá)水平分別為正常對(duì)照組的512倍、451倍、275倍和249倍。
　　與正常對(duì)照組比較，實(shí)驗(yàn)組的IL-17和IFN-α的蛋白質(zhì)水平也明顯升高，具有顯著性差異，P

6、＜0.05。
　　結(jié)論:慢性乙肝患者的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)模式識(shí)別受體NOD1、NOD2、RIG-1和MDA5，轉(zhuǎn)錄因子IRF7，抗病毒的細(xì)胞因子IFN-α和IFN-β，促炎癥細(xì)胞因子IL-6，以及趨化因子IL-8、CXCL1和CXCL2的mRNA水平與健康人相比較，測(cè)定水平均顯著升高.Th17型細(xì)胞因子IL-17和抗病毒的細(xì)胞因子IFN-α的蛋白質(zhì)水平與健康人相比較，測(cè)定水平也顯著升高，這些結(jié)果提示:細(xì)胞質(zhì)內(nèi)模式識(shí)別受體可能在慢性乙型肝炎的