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文檔簡介
1、 目的 研究Notch信號通路中的幾個重要蛋白分子Notch1、Notch3和Notch4受體及JAGGED1和DLL4配體基因在乳腺癌中的表達及其與乳腺癌相關(guān)因素的關(guān)系,以探討Notch信號通路在人類乳腺癌中的作用,并為乳腺癌治療中針對Notch系統(tǒng)的靶向藥物研究與開發(fā)提供一定的實驗依據(jù)。
方法 收集乳腺癌患者的癌標本62例,癌旁標本22例,并將癌標本分組。用Trizol等提取標本總RNA,設(shè)計內(nèi)參照β-actin基因及目
2、的基因Notch1、Notch3、Notch4、JAG1和DLL4的PCR特異引物,采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(RT-PCR)方法擴增這六個基因特定的基因片段。以人乳腺癌細胞株(MDA-MB-435S)及A4癌標本為陽性對照,對擴增的基因片段進行測序,以確定其為目的基因片段。RT-PCR產(chǎn)物用2%普通瓊脂糖凝膠電泳,在凝膠分析系統(tǒng)下拍照并獲得其灰度值,同一標本的待測基因與其β-actin基因的灰度值之比即為其半定量數(shù)值(即反映mRNA相對
3、表達水平或強度的標準化系數(shù)),以SPSS10.0統(tǒng)計軟件進行組間標準化系數(shù)統(tǒng)計學分析。
結(jié)果
1.Notch受體及配體在乳腺癌標本與癌旁標本中的表達
癌標本Notch1 mRNA陽性表達率高于癌旁標本;癌旁標本其它兩種受體和配體均無表達;表達Notch1 mRNA的癌標本,其Notch1 mRNA標準化系數(shù)高于表達Notch1 mRNA的癌旁標本。
2.Notch受體及配體在乳腺癌中的表達
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