痛風(fēng)方治療痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎急性期濕熱蘊結(jié)證模型大鼠療效研究.pdf

1、目的:以中醫(yī)理論為指導(dǎo)，結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)學(xué)實驗方法，建立病證結(jié)合的大鼠急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎濕熱蘊結(jié)證模型，根據(jù)國家級名老中醫(yī)房定亞教授的臨床經(jīng)驗，用痛風(fēng)方治療濕熱蘊結(jié)證大鼠急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎，通過觀察治療前后大鼠的踝關(guān)節(jié)腫脹程度、血清炎癥指標變化以及造模側(cè)肢體滑膜組織的形態(tài)學(xué)改變，探討痛風(fēng)方對大鼠急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎濕熱蘊結(jié)證的療效并分析其可能機制，為該方的臨床運用提供依據(jù)。
　　方法:SPF級雄性Wistar大鼠60只，隨機分為正常組、模型組、

2、痛風(fēng)方低、中、高劑量組、西藥組，每組10只。痛風(fēng)方低、中、高劑量組的給藥劑量分別為:0.293g/kg/d、0.585g/kg/d、1.170g/kg/d，西藥組用雙氯芬酸鈉緩釋片13.5mg/kg/d，正常組、模型組以等量生理鹽水灌胃，療程18天。除正常組外其余各組均予高糖高脂飲食，200g/L蜂蜜水自由飲用，油脂(1g/100g)和52％紅星二鍋頭(1ml/100g)交替灌服。于用藥后第11天（即第18天），除正常組外均加灌10ml

3、/kg的鼠傷寒沙門氏菌，120h（即第23天）后加強感染一次，所灌菌量減半，正常組灌服等量生理鹽水。于用藥后第17天（即第24天），通過改良的Coderre法將各組大鼠右側(cè)踝關(guān)節(jié)注射尿酸鹽造模，正常組注入等量的生理鹽水。分別于造模前、造模后的第4h、8h、24h、48h用足趾體積法、周長法測量大鼠踝關(guān)節(jié)腫脹程度，用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定大鼠血清中IL-1β、TNF-α、TGF-β1、UA、CRP的含量，切取大鼠右側(cè)踝關(guān)節(jié)的滑膜

4、組織，制備切片后HE染色，鏡下觀察大鼠滑膜組織病理改變形態(tài)學(xué)評分，并對治療后各組的肝腎功能等指標進行檢測，觀察藥物的安全性。
　　結(jié)果:1.灌服鼠傷寒沙門氏菌的大鼠出現(xiàn)毛發(fā)疏松粗糙、陰囊松弛下垂、倦怠、嗜臥、行動緩慢，大便稀溏，肛溫升高，肛周污穢，提示大鼠濕熱蘊結(jié)證造模成功。注射尿酸鈉晶體的大鼠踝關(guān)節(jié)出現(xiàn)不同程度的紅腫熱痛、關(guān)節(jié)屈伸不利、行走緩慢，炎癥高峰時有的甚至表現(xiàn)為三足步態(tài)，提示大鼠急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎造模成功。2.用體積法和周

5、長法（游標卡尺法）測各組大鼠的踝關(guān)節(jié)腫脹度，于造模后第24小時達到最高值，其后各組腫脹度均有不同程度減輕，測量造模后48h各組腫脹度顯示模型組腫脹度仍最高，中中組最低。3.各組間IL-1β、 TNF-α、TGF-β1、UA、CRP等指標進行比較，模型組與正常組有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)，提示造模成功。TGF-β1:中中組、中高組與西藥組相比，無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)，說明中中組、中高組促進TGF-β1的表達與西藥組相當。中、西藥組

6、對UA的影響無統(tǒng)計學(xué)差異，(P＞0.05);在IL-1β、TNF-α、CRP等炎性指標的控制上，中藥組與西藥組也無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)，說明中藥組控制上述指標的療效與西藥組相當。安全性指標肝腎功能比較，中藥組總體優(yōu)于西藥組。綜上所述，中藥組治療急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎療效不弱于西藥組，以中藥中劑量最為明顯。4.滑膜組織病理學(xué)改變:正常組與模型組相比，模型組滑膜細胞及間質(zhì)血管增生、充血，可見淋巴細胞浸潤;西藥組:偶見滑膜細胞增生，少許淋巴細

7、胞浸潤，血管可見充血;中中組、中高組效果同西藥組;中低組病變程度略好于模型組。
　　結(jié)論:1.采用高糖高脂飲食、蜂蜜水自由飲用、兩次灌服鼠傷寒沙門氏菌建立的濕熱蘊結(jié)證模型，具備該證型的證候?qū)W特征;采用改良后的Coderre法建立急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎模型，具備該病急性期的基本特征，造模方法可操作性強，造模成功。
　　2.痛風(fēng)方可改善MSU致大鼠急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的關(guān)節(jié)腫脹及滑膜組織病理學(xué)改變，其機制可能與痛風(fēng)方抑制IL-1β、TNF