性激素對小鼠免疫的影響.pdf

1、傳染性疾病的防控一直是規(guī)模養(yǎng)殖場的工作重點(diǎn),疫苗接種是預(yù)防傳染病的有效方法之一,但免疫失敗的情況仍時有發(fā)生,給畜牧業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。畜禽機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答是一個復(fù)雜的,受多種因素影響的過程,在影響機(jī)體免疫應(yīng)答能力的諸多因子中,性激素的作用不可忽視。本論文研究了外源性雌激素、外源性雄激素以及異性對小鼠免疫應(yīng)答的影響,為在實(shí)踐中如何增強(qiáng)機(jī)體的免疫應(yīng)答作用提供參考。1、外源性雌激素對雌性小鼠免疫應(yīng)答的影響目的觀察雌二醇和具有雌激素樣作用的

2、人參皂甙Rb1和Rg1對雌鼠的免疫應(yīng)答的影響。方法將72只ICR小鼠隨機(jī)分為9組,每組8只。給抑制劑對照組連續(xù)一周經(jīng)腹股溝皮下注射ICI182,780(氟維斯群)(200μg/d)后,各組分別按如下方案進(jìn)行免疫:組1:生理鹽水;組2:OVA(10μg);組3:200μg ICI(注射含10gμOVA和200μg ICI的混合疫苗,下同);組4:30μg雌二醇(E2);組5:30μg E2+200μg ICI;組6:50μg Rb1;組7

3、:50μg Rb1+200μg ICI;組8:50μg Rg1;組9:50μg Rg1+200μg ICI。3周后加強(qiáng)免疫一次,方法同前。在免疫后2周采血測血清抗OVA特異性抗體IgG及其亞類水平;無菌分離脾淋巴細(xì)胞后,采用MTT法檢測淋巴細(xì)胞增殖;RT-PCR法測定脾淋巴細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞因子mRNA的水平。結(jié)果外源雌激素(E2)可以提高小鼠的抗OVA特異性抗體水平以及抗體亞類IgG1水平,細(xì)胞因子(IFN-γ、IL-12、IL-4和IL-

4、10)和轉(zhuǎn)錄因子(T-bet和GATA-3)的mRNA表達(dá)水平,且均顯著高于其抑制劑對照組。具有雌激素樣作用的人參皂甙Rg1、Rb1可以提高小鼠抗OVA特異性抗體IgG和抗體亞類水平,顯著促進(jìn)脾臟淋巴細(xì)胞增殖能力和4種細(xì)胞因子和2種轉(zhuǎn)錄因子的mRNA表達(dá)水平,且均顯著高于或稍高于各自的抑制劑對照組。結(jié)論雌激素和人參皂甙Rg1、Rb1都具有免疫調(diào)節(jié)作用,雌激素主要促進(jìn)Th2型免疫應(yīng)答,人參皂甙可促進(jìn)Th1和Th2型免疫應(yīng)答。雌激素和人參皂

5、甙Rg1、Rb1的免疫調(diào)節(jié)作用與雌激素受體存在一定關(guān)聯(lián)。2、外源性雄激素對雄性小鼠免疫應(yīng)答的影響目的觀察睪酮(Te)對小鼠的免疫應(yīng)答的影響,同時運(yùn)用雄激素受體拮抗劑氟他胺,研究人參皂甙的免疫調(diào)節(jié)作用是否與雄激素受體有關(guān)。方法將72只ICR小鼠隨機(jī)分為9組,每組8只。對抑制劑對照組連續(xù)一周經(jīng)腹股溝皮下注射氟他胺(300μg/d)后,各組分別按如下方案進(jìn)行免疫:組1:生理鹽水;組2:OVA(10μg);組3:300μg Flu(注射含10μ

6、g OVA和300μg Flu的混合疫苗,下同);組4:50μg Te;組5:50μg Te+300μg Flu;組6:50μg Rb1;組7:50μg Rb1+300μgFlu;組8:50μg Rg1;組9:50μg Rg1+300μg Flu.3周后加強(qiáng)免疫一次,方法同前。在免疫后2周采血測血清抗OVA特異性抗體IgG及其亞類水平;無菌分離脾淋巴細(xì)胞后,采用MTT法檢測淋巴細(xì)胞增殖;RT-PCR法測定脾淋巴細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞因子mRNA的

7、水平。結(jié)果外源雄激素不能提高小鼠抗OVA特異性抗體和各抗體亞類水平以及淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力,且與雄激素抑制劑對照組未形成顯著差異;人參皂甙Rg1、Rb1可以提高小鼠抗OVA特異性免疫應(yīng)答水平,但較其雄激素抑制劑對照組無顯著差異。結(jié)論雄激素不能上調(diào)機(jī)體對抗原注射的免疫應(yīng)答反應(yīng),且與雄激素受體之間的關(guān)聯(lián)性不明顯。人參皂甙的免疫調(diào)節(jié)作用與雄激素受體無關(guān)。3、同種異性小鼠對免疫反應(yīng)的影響目的觀察同種異性對小鼠激素水平及其對免疫反應(yīng)的影響。方法實(shí)驗(yàn)一

8、:將30只ICR雌鼠隨機(jī)分成3組,每組10只,第3組中添加一只雄鼠(為防止雌鼠懷孕,在試驗(yàn)前對此雄鼠實(shí)行了輸精管結(jié)扎術(shù))。實(shí)驗(yàn)二:將30只ICR雄鼠隨機(jī)分成3組,每組10只,第3組多一只雌鼠。分別注射生理鹽水(組1)或OVA(組2,組3),3周后加強(qiáng)免疫一次,方法同前。2免后2周眼眶采血,雙抗體夾心ABC-ELISA法檢測小鼠血清中雌二醇(E2)和睪酮(Te)的含量;間接ELISA法檢測血清抗OVA抗體水平;無菌分離脾淋巴細(xì)胞后,RT-

9、PCR法測定脾淋巴細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞因子mRNA的水平。結(jié)果異性小鼠可使雌、雄性小鼠血清中雌二醇水平顯著提高而睪酮并無顯著變化,雌雄小鼠的抗OVA特異性IgG抗體水平均顯著提高,雌鼠Th1類的細(xì)胞因子(IFN-γ和IL-12)和轉(zhuǎn)錄因子T-bet的mRNA表達(dá)水平下降以及Th2類的細(xì)胞因子(IL-4和IL-10)和轉(zhuǎn)錄因子GATA-3的mRNA表達(dá)水平顯著提高;雄鼠Th1類細(xì)胞因子和轉(zhuǎn)錄因子的mRNA表達(dá)水平上升，而Th2類細(xì)胞因子和轉(zhuǎn)錄因子