“乳康方”對(duì)乳腺增生大鼠性激素含量及雌激素受體表達(dá)的影響.pdf

1、目的：“乳康方”由柴胡、浙貝母、夏枯草、鹿角膠等藥物組成，具有疏肝解郁，活血化瘀之效。本實(shí)驗(yàn)采用肌注苯甲酸雌二醇和黃體酮的方法，復(fù)制乳腺增生的大鼠模型，通過觀察各組大鼠胃黏膜病理形態(tài)、血清雌激素（E2）和孕激素（P）的變化及雌激素受體的表達(dá)，以驗(yàn)證“乳康方”的藥效，并從調(diào)節(jié)性激素水平和雌激素受體表達(dá)的角度探討該方治療乳腺增生病的作用機(jī)制。
　　 方法：選用健康清潔級(jí)雌性wistar大鼠70只，75～85日齡，體重220±20g，

2、常規(guī)喂養(yǎng)1周后，按照隨機(jī)數(shù)字表法將其分為6組：即空白對(duì)照組（正常組、Normal Group）、模型對(duì)照組模型組、Model Group）、乳癖消對(duì)照組（乳癖消組、RP）、三苯氧胺對(duì)照組（TAM Group）、乳康方低劑量組（乳康方Ⅰ組、RⅠ）、乳康方高劑量組（乳康方Ⅱ組、RⅡ）。正常組與模型組每組15只大鼠，其余四組每組10大鼠。正常組給予每只大鼠右下肢肌注生理鹽水注射液0.2ml/kg/d，共干預(yù)30天；其余組給予每只大鼠右下肢肌注

3、射苯甲酸雌二醇0.5mg/kg/d，共25天，然后改為每只大鼠右下肢肌注射黃體酮注射液5mg/kg/d，共5天。實(shí)驗(yàn)第31天隨機(jī)從模型組和正常組各抽取5只大鼠，無菌操作楔形取下大鼠第3對(duì)乳房，用4％的多聚甲醛溶液固定，石蠟包埋切片，常規(guī)HE染色，在光鏡下進(jìn)行組織形態(tài)學(xué)觀察。光鏡下顯示模型組大鼠乳腺組織乳腺腺管和腺泡明顯增生，提示造模成功。成功建立乳腺增生大鼠的模型后，各組開始分組治療，每日每組按10ml/kg/只體重灌服：乳癖消片混懸液

4、，TAM混懸液，乳康方低劑量湯藥，乳康方高劑量湯藥，正常組及模型組均分別按10ml/kg/只體重灌服生理鹽水，共30天。實(shí)驗(yàn)結(jié)束大鼠無一死亡。末次灌胃后，大鼠禁食24小時(shí)，斷頭取血，制備血清，放射免疫法測(cè)定血清雌二醇（E2）、孕酮（P）含量。無菌操作楔形取下大鼠第3對(duì)乳房，一側(cè)用4％的多聚甲醛溶液固定，石蠟包埋切片，常規(guī)HE染色，在光鏡下進(jìn)行組織形態(tài)學(xué)觀察。一側(cè)乳腺組織作石蠟包埋，免疫組化法檢測(cè)ER，電鏡下觀察陽性細(xì)胞數(shù)并做積分分析。<

5、br>　　 結(jié)果：
　　 1、“乳康方”對(duì)乳腺增生大鼠病理形態(tài)學(xué)的影響
　　 正常組乳腺導(dǎo)管上皮排列規(guī)則，導(dǎo)管腔、腺泡腔無擴(kuò)張，小葉及小葉中腺泡數(shù)極少。模型組大鼠乳房增大，乳腺增生呈彌漫性，乳腺的腺泡及導(dǎo)管大量增生，小葉內(nèi)腺泡密集，大小不等，腺泡腔和腺導(dǎo)管腔明顯擴(kuò)張，腔內(nèi)出現(xiàn)大量分泌物。乳康方Ⅰ組、Ⅱ組與模型組比較，腺泡數(shù)量不多，腔內(nèi)分泌物較少。乳癖消組、他莫西芬組均有不同程度的腺泡增生，但腺泡腔和腺導(dǎo)管腔擴(kuò)張不明顯，

6、腔內(nèi)分泌物不多。
　　 2、“乳康方”對(duì)乳腺增生大鼠血清中E2含量的影響
　　 與正常組相比，模型組大鼠血清中E2的含量明顯升高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；乳癖消組、TAM組、乳康方Ⅰ組、乳康方Ⅱ組分別與模型組比較，E2含量均降低，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；乳康方Ⅱ組分別與乳癖消組、TAM組、乳康方Ⅰ組比較，E2含量明顯降低，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。
　　 3、“乳康方”對(duì)乳腺增生大鼠血清中的P含

7、量的影響
　　 與正常組相比，模型組大鼠血清中P的含量明顯降低，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；乳癖消組、TAM組、乳康方Ⅰ組、乳康方Ⅱ組分別與模型組比較，P含量均升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；乳康方Ⅱ組分別與乳癖消組、TAM組、乳康方Ⅰ組比較，P含量明顯升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　 4、“乳康方”對(duì)乳腺增生大鼠ER表達(dá)的影響
　　 被染為棕黃色粗顆粒狀的細(xì)胞為ER表達(dá)的陽性細(xì)胞。模型組的陽性

8、細(xì)胞數(shù)量較正常組顯著增多。乳康方Ⅰ組、Ⅱ組與模型組相比可明顯抑制陽性細(xì)胞數(shù)量，且陽性細(xì)胞數(shù)明顯少于乳痞消組、TAM組。乳痞消組、TAM組分別和模型組相比，陽性細(xì)胞數(shù)明顯少于模型組。
　　 與正常組相比，模型組ER積分明顯升高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；乳康方Ⅱ組與正常組比較，ER積分無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.1）；乳康方Ⅱ組分別與乳康方Ⅰ組、乳癖組和TAM組比較，ER積分明顯降低，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；乳康方Ⅰ組分別