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文檔簡介
1、目的:制備經(jīng)前期綜合征(premenstrual syndrome,PMS)肝氣郁證大鼠模型,研究該模型的評(píng)價(jià)指標(biāo);檢測(cè)不同腦區(qū)內(nèi)雌激素受體的表達(dá),探討PMS肝氣郁證發(fā)病的微觀機(jī)制,并探究中藥復(fù)方制劑經(jīng)前舒顆粒對(duì)PMS肝氣郁證的干預(yù)作用。 方法:采用束縛法、居住-入侵法制備PMS肝氣郁證大鼠模型,以調(diào)肝方藥經(jīng)前舒顆粒進(jìn)行藥物干預(yù)。采用細(xì)胞涂片法觀察大鼠陰道細(xì)胞形態(tài),確定動(dòng)情周期:接收期與非接收期。以曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)和懸尾實(shí)驗(yàn)兩種行為學(xué)方
2、法評(píng)價(jià)模型。造模后,將各組大鼠斷頭處死,迅速取出額葉皮層、海馬、下丘腦、邊緣葉這四個(gè)腦區(qū)。提取腦組織的總蛋白。用蛋白質(zhì)印跡技術(shù)(western blot,WB)檢測(cè)各腦區(qū)雌激素受體α與β(ERα、ERβ)兩種受體在不同腦區(qū)的表達(dá)水平。 結(jié)果:與空白組相比,居住-入侵造模組(居住組)及居住-入侵造模給藥組(居住給藥組)大鼠體重變化顯著(P<0.05,P<0.01)。行為學(xué)檢測(cè)表明:在接收期,與空白組大鼠相比,束縛組和居住組大鼠懸尾
3、不動(dòng)時(shí)間顯著增加(P<0.01);而與兩造模組相比,相應(yīng)的兩造模給藥組大鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間均顯著減少(P<0.01)。在非接受期,與空白組大鼠相比,束縛組和居住組大鼠曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)的水平得分、垂直得分及總分均顯著減少,但懸尾不動(dòng)時(shí)間顯著增加(P<0.01);與兩造模組相比,相應(yīng)的兩造模給藥組大鼠曠場(chǎng)水平得分、垂直得分及總分均顯著增加,但懸尾不動(dòng)時(shí)間均顯著減少(P<0.01)。蛋白印跡實(shí)驗(yàn)表明,與空白組大鼠相比,束縛組大鼠額葉皮層、海馬、下丘腦、邊
4、緣葉ERα表達(dá)顯著升高(P<0.01);居住組大鼠邊緣葉與下丘腦ERα表達(dá)顯著升高(P<0.01),皮層表達(dá)量亦顯著升高(P<0.05);束縛組與居住組各指標(biāo)均無顯著性差異;與模型組比較,給藥組各腦區(qū)的ERα表達(dá)水平不同程度的降低。與空白組大鼠相比,束縛組大鼠額葉大腦皮層、海馬、下丘腦、邊緣葉ERβ表達(dá)顯著升高(P<0.01);居住組大鼠皮層與海馬ERβ表達(dá)顯著升高(P<0.01),在下丘腦、邊緣葉的表達(dá)亦升高(P<0.05);束縛組與
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