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1、目的:本課題以整體動(dòng)物研究結(jié)果為基礎(chǔ),采用慢性束縛應(yīng)激法復(fù)制經(jīng)前期綜合征(prem-enstrual syndrome, PMS)肝氣郁證大鼠模型,觀察模型大鼠含藥血清對(duì)新生大鼠海馬神經(jīng)元ERp及相關(guān)基因5-HT1AR,5-HTT, MAO-A/B mRNA水平的影響,從基因轉(zhuǎn)錄水平探討PMS肝氣郁證發(fā)病機(jī)制及經(jīng)前舒顆粒治療PMS肝氣郁證作用機(jī)制,為經(jīng)前期綜合征肝氣郁證的臨床治療提供可靠的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:采用陰道涂片鏡檢法篩
2、選處于動(dòng)情周期非接受期的大鼠進(jìn)入實(shí)驗(yàn),隨機(jī)分為正常對(duì)照組、PMS肝氣郁證模型組和經(jīng)前舒顆粒給藥組;造模及藥物干預(yù)完成以后,處死大鼠,收集各組血清,備用;采用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),應(yīng)用各處理組血清對(duì)體外培養(yǎng)大鼠海馬神經(jīng)元進(jìn)行干預(yù),并采用半定量RT-PCR方法分別對(duì)各組細(xì)胞ERβ及相關(guān)基因5-HT1AR,5-HTT, MAO-A/B mRNA水平進(jìn)行檢測(cè)。
結(jié)果:慢性束縛應(yīng)激法造模能夠有效模擬婦女經(jīng)前抑郁,經(jīng)后抑郁癥狀消失的特點(diǎn);RT-P
3、CR檢測(cè)結(jié)果顯示,與正常組相比,模型組血清能顯著升高大鼠海馬神經(jīng)元ERβ, MAO-A mRNA水平(p<0.05),并能顯著降低大鼠海馬神經(jīng)元5-HT1AR,5-HTT mRNA水平(p<0.05),經(jīng)前舒顆粒含藥血清能顯著改善PMS肝氣郁證模型組血清干預(yù)的大鼠海馬神經(jīng)元ERβ, MAO-A和5-HT1AR,5-HTT基因轉(zhuǎn)錄水平的異常狀況(p<0.05); MAO-B mRNA水平,正常對(duì)照組、PMS肝氣郁證模型組和經(jīng)前舒顆粒給藥組
4、血清分別干預(yù)后,未見(jiàn)顯著性差異(p>0.05)。
結(jié)論:采用慢性束縛應(yīng)激法成功復(fù)制出PMS肝氣郁證大鼠模型;各處理組血清干預(yù)的大鼠海馬神經(jīng)元ERβ及相關(guān)基因5-HT1AR,5-HTT, MAO-A mRNA水平的異常變化提示ERβ及相關(guān)基因5-HT1AR,5-HTT, MAO-A是調(diào)肝方藥經(jīng)前舒顆粒的作用靶點(diǎn),經(jīng)前舒顆??赡芡ㄟ^(guò)影響ERβ及相關(guān)基因5-HT1AR,5-HTT, MAO-AmRNA的轉(zhuǎn)錄而發(fā)揮治療作用,MAOB與
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