馬桑內(nèi)酯對大鼠海馬神經(jīng)元鈉電流的影響.pdf

1、目的：馬桑內(nèi)酯(CoriariaLatcon，CL)是從植物馬桑中提取的一種快速、有效的致癇劑，其建立的癲癇模型可以表現(xiàn)出多種發(fā)作形式，并具有一定的耐藥性。但其作用機(jī)制尚未完全清楚。本實驗旨在研究CL對急性分離的SD大鼠海馬神經(jīng)元鈉離子電流的影響，并探討其意義。 方法：用胰蛋白酶消化加吹打的方法急性分離SD大鼠(出生后7-14天)海馬神經(jīng)細(xì)胞，并用銀染法對所分離的細(xì)胞進(jìn)行驗證。在膜片鉗的全細(xì)胞模式下，對細(xì)胞膜上鈉離子通道的電生理

2、活動進(jìn)行記錄。所得電流經(jīng)過膜片鉗放大器(Axopatch200B)放大，濾波(1KHz)后，輸入計算機(jī)，用pCLAMP8.1軟件系統(tǒng)(AxonInstruments)進(jìn)行數(shù)據(jù)采集與分析。同時研究20μl/ml和40μl/ml兩個濃度的CL對峰值鈉電流以及鈉通道電壓依賴性激活的影響。采用同一細(xì)胞加用CL前后自身比較以及不同濃度組之間比較的方法，對各組數(shù)據(jù)用SPSS11.0進(jìn)行t檢驗或單因素方差分析，實驗結(jié)果以“均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”((-x)±s

3、)的形式表示，以P＜0.05為具有統(tǒng)計學(xué)差異。 結(jié)果：銀染法證實分離所得的海馬細(xì)胞是神經(jīng)元。其細(xì)胞膜上可以記錄到內(nèi)向的鈉電流和外向的鉀電流，離子通道的活性具有電壓依賴性。該鈉電流快速激活后快速失活，對河豚毒素(TTX)敏感。給以20μl/ml，40μl/ml的CL三分鐘后均可以不同程度地使峰值鈉電流的幅度增加(分別為17.32±8.52％，和37.98±4.91％)；與對照組(3.16±3.65％)相比，40μl/ml(P＜0.