左乙拉西坦對(duì)馬桑內(nèi)酯致癇海馬細(xì)胞鈉電流的影響.pdf

1、研究目的：探討左乙拉西坦(Levetiracetam，LEV)對(duì)馬桑內(nèi)酯(Coriarialactone，CL)致急性分離大鼠海馬神經(jīng)元鈉電流增加的影響。 方法：采用7～14d的SD大鼠，雌雄不限，以胰蛋白酶法制備海馬神經(jīng)元，用銀染的方法確定細(xì)胞為神經(jīng)元細(xì)胞，利用膜片鉗放大器(Axopatch200B，AxonInstruments，USA)和Clampex(8.01Axon，InstrumentsUSA)軟件，采用全細(xì)胞膜片鉗

2、技術(shù)，記錄到能被河豚毒素(TTX)阻斷的內(nèi)向電流，即為Na+電流，然后在細(xì)胞外液中加入CL使終濃度達(dá)到40μl/ml，CL可使Na+電流增加，將細(xì)胞分為蒸餾水空白對(duì)照組、LEV7.5μl/ml(150μmol/L)組、LEV15μl/ml(300μmol/L)組、未處理組。每組n=5；觀察LEV對(duì)電壓依賴性鈉電流增加的影響。同時(shí)應(yīng)用LEV對(duì)神經(jīng)元進(jìn)行預(yù)處理，先在細(xì)胞外液加入LEV15μl/ml，再給予CL，與未經(jīng)LEV處理組和對(duì)照組進(jìn)行

3、比較，每組n=5；觀察LEV對(duì)CL所致鈉電流的增加有無(wú)保護(hù)作用。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件包，自身前后進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析。 結(jié)果：1、在海馬神經(jīng)元上記錄到被1μmol/L的河豚毒素(TTX)完全阻斷內(nèi)向電流。 2、加入CL后，鈉電流幅度增加，7.5μl/ml、15μl/ml和空白對(duì)照組三組最大電流值和電流密度及波幅的增加沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差(P＞0.05)，具有可比性。 3、給予7.

4、5μl/mlLEV進(jìn)行干預(yù)，鈉電流的幅度仍在增加，其最大電流值與最大電流密度自身前后比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05，P＜0.01)，與未處理組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。15μl/ml后鈉電增加增加不明顯，與7.5μl/ml比較，最大電流值、電流密度、電流增加均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。與蒸餾水空白對(duì)照組比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。 4、在CL引起峰值鈉電流幅度增加后用LEV干預(yù)，得到Ⅰ-Ⅴ曲線，對(duì)加LEV前

5、后閾電位、最大激活電位進(jìn)行比較，統(tǒng)計(jì)學(xué)上無(wú)差異(P＞0.05)。 5、經(jīng)40min15μl/mlLEV預(yù)處理的神經(jīng)元在CL作用下仍有明顯的鈉電流增加，與未處理組比較，最大電流值、最大電流密度、電流增加均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，與蒸餾水空白對(duì)照組比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。 結(jié)論：1.LEV不能降低由CL造成的急性致癇海馬細(xì)胞增加的鈉電流。 2.LEV預(yù)處理也不能降低CL引起的急性致癇海馬細(xì)胞鈉電流增