擬除蟲(chóng)菊酯對(duì)棉鈴蟲(chóng)和大鼠海馬神經(jīng)元鈉鉀電流的影響.pdf

1、論文用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)在急性分離培養(yǎng)的棉鈴蟲(chóng)中樞神經(jīng)細(xì)胞和海馬錐體神經(jīng)元上，分別觀察三氟氯氰菊酯對(duì)棉鈴蟲(chóng)和海馬神經(jīng)細(xì)胞通道電流的作用影響。旨在研究殺蟲(chóng)劑對(duì)棉鈴蟲(chóng)中樞神經(jīng)細(xì)胞鉀通道有無(wú)作用以及作用機(jī)制，進(jìn)一步研究棉鈴蟲(chóng)抗性形成機(jī)制；研究殺蟲(chóng)劑對(duì)哺乳動(dòng)物神經(jīng)細(xì)胞鈉鉀通道的毒性影響及作用方式，探討殺蟲(chóng)劑對(duì)害蟲(chóng)和哺乳動(dòng)物神經(jīng)細(xì)胞毒性的差異，以期為設(shè)計(jì)具有新靶標(biāo)和對(duì)害蟲(chóng)高效、對(duì)哺乳動(dòng)物低毒的有效藥物提供理論依據(jù)。主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下： 1.細(xì)

2、胞培養(yǎng)：分離得到的棉鈴蟲(chóng)和海馬神經(jīng)細(xì)胞，胞體明亮，有較長(zhǎng)突起，細(xì)胞表面光潔，有較強(qiáng)的光暈，立體感強(qiáng)，貼壁良好。 2.三氟氯氰菊酯對(duì)棉鈴蟲(chóng)神經(jīng)細(xì)胞瞬間外向鉀電流的影響：結(jié)果表明，加藥前通道在-40mV左右激活，三氟氯氰菊酯(10-5mmol/L)作用后，激活電壓向負(fù)電位方向移動(dòng)約10mV，通道在-50mV左右激活，電流幅值未有明顯變化；加藥前后激活曲線的Vh、k值和形狀無(wú)明顯改變；失活曲線左移且Vh變化明顯，給藥前后的Vh和k分別

3、為-48.472±0.763、8.123±0.672和-59.299±1.46、10.573±1.36。但k值沒(méi)有明顯變化。 3.三氟氯氰菊酯對(duì)棉鈴蟲(chóng)神經(jīng)細(xì)胞延遲整流鉀電流的影響：結(jié)果表明，藥物作用前分別有81％和39％的細(xì)胞的通道在-30mV和-40mV激活(n=21)。三氟氯氰菊酯(10-5mmol/L)作用15min后，分別有63％和38％細(xì)胞的通道在-40mV和-50mV激活(n=8)；作用1min后電流幅值明顯降低，抑

4、制率達(dá)到了37.7％(n=19)；加藥后激活曲線明顯左移且Vh值變化顯著，給藥前后的Vh和k分別為11.4±2.32、20.5±2.19和2.45±0.878、24.9±1.15。 4.三氟氯氰菊酯對(duì)大鼠海馬錐體神經(jīng)元鉀電流的作用影響：結(jié)果表明，低濃度(10-7mmol/L)和高濃度(10-5mmol/L)三氟氯氰菊酯對(duì)瞬間外向鉀通道分別有激活和抑制作用，但它們對(duì)峰電流的改變沒(méi)有顯著性差異。高濃度三氟氯氰菊酯使通道激活曲線稍微右

5、移，Vh和k改變不明顯；但是能夠使通道失活曲線明顯左移，給藥前和給藥后10minVh和k分別為-70.711±0.445mV、7.2840±0.403和-90.398±0.839mV、11.602±0.658，半數(shù)激活電壓Vh改變顯著。但試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)藥物對(duì)延遲整流鉀電流峰值沒(méi)有影響。 5.高濃度三氟氯氰菊酯對(duì)大鼠海馬神經(jīng)元鈉通道的影響：高濃度三氟氯氰菊酯(10-3mmol/L)作用后，海馬錐體神經(jīng)元鈉電流顯著降低，最大抑制率為32

6、.6％。鈉通道的激活電位在-70mV左右，藥物作用前后改變不大。峰值電壓左移大約10mV。激活曲線的Vh向負(fù)方向移動(dòng)8mV左右。但是失活曲線的Vh向負(fù)方向移動(dòng)17mV左右。但k值沒(méi)有明顯變化。 6.低濃度三氟氯氰菊酯對(duì)大鼠海馬神經(jīng)元鈉通道的影響：低濃度三氟氯氰菊酯(10-5mmol/L)作用后，海馬錐體神經(jīng)元鈉電流峰值增加明顯，最大增加率為26.6％。鈉通道的激活電位向超極化方向移動(dòng)10mV左右。峰值電壓移動(dòng)20mV，從-30m

7、Vto-50mV。激活曲線的Vh向負(fù)方向移動(dòng)10mV左右，k值變化顯著。失活曲線的Vh向負(fù)方向移動(dòng)8mV左右。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：三氟氯氰菊酯促進(jìn)了棉鈴蟲(chóng)神經(jīng)細(xì)胞瞬間外向鉀通道的失活。顯著抑制延遲整流鉀電流電流峰值，棉鈴蟲(chóng)中樞神經(jīng)細(xì)胞鉀通道也是擬除蟲(chóng)菊酯類藥物的作用靶標(biāo)之一。大鼠海馬錐體神經(jīng)元鉀通道是三氟氯氰菊酯的作用靶標(biāo)，通道失活失活曲線的改變是藥物作用的主要方式。不同濃度三氟氯氰菊酯對(duì)大鼠海馬神經(jīng)元鈉電流有不同的作用影響，激活電