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1、主要應(yīng)用膜片鉗技術(shù)的全細(xì)胞和單通道記錄模式,研究了甜菜夜蛾(Laphygma exigua)幼蟲中樞神經(jīng)元的興奮性機(jī)制,以及細(xì)胞膜電壓門控離子通道的特性,并分析了三氟氯氰菊酯(Cyhalothrin,Cyh)對(duì)甜菜夜蛾神經(jīng)元興奮性的影響。 在電流鉗位的條件下分析了甜菜夜蛾神經(jīng)元的興奮性。結(jié)果表明,在甜菜夜蛾幼蟲的中樞神經(jīng)系統(tǒng)里,至少存在兩種興奮性機(jī)制不同的神經(jīng)細(xì)胞。多數(shù)神經(jīng)元所發(fā)放的動(dòng)作電位屬于典型的鈉峰(Sodium spik
2、e),其上升相依賴于鈉電流且能被TTX完全阻斷,動(dòng)作電位的復(fù)極化主要由I<,A>,I<,K>和I<,K(Ca)>三種鉀電流介導(dǎo)。但對(duì)于少數(shù)神經(jīng)細(xì)胞,發(fā)放的動(dòng)作電位是由于鈣離子內(nèi)流引起,在復(fù)極化相具有明顯的平臺(tái)期,用TTX阻斷鈉電流對(duì)其影響較小,阻斷鈣電流能使這種“鈣峰”(Calcium spike)消失。 在外液中施加濃度為10<'-7>、10<'-6>和10<'-5>mmol/L的三氟氯氰菊酯。結(jié)果表明,三個(gè)濃度的藥物效果相似
3、,但產(chǎn)生效果所需的時(shí)間依次縮短。三氟氯氰菊酯能降低動(dòng)作電位的幅度,隨著時(shí)間的延長(zhǎng)(1min、5min、15min),從96.7 mV到68 mV再到65 mV。而動(dòng)作電位的時(shí)程隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而增加,零線寬度從0.6ms到3.7 ms再到1.7 ms。但對(duì)連放的頻率的影響很小。這說明三氟氯氰菊酯能抑制甜菜夜蛾幼蟲中樞神經(jīng)元的興奮性。三氟氯氰菊酯對(duì)放電幅度的抑制和時(shí)程的延長(zhǎng),可能是分別通過對(duì)鈉電流和鉀電流的抑制來實(shí)現(xiàn)的。 在全細(xì)胞電
4、壓鉗下記錄了兩種神經(jīng)元的膜電流。將細(xì)胞分別鉗制在-70 mV,然后給予60 ms的去極化刺激,發(fā)放鈉峰和鈣峰的兩種神經(jīng)元的膜電流種類和大小明顯不同,這是兩種不同的神經(jīng)元放電的離子基礎(chǔ)。發(fā)放鈉峰的細(xì)胞具有較大的內(nèi)向鈉電流(5-8 nA)和外向鉀電流(12-18 nA),而內(nèi)向鈣電流多數(shù)為外向的鉀電流所抵消。而對(duì)于發(fā)放鈣峰的神經(jīng)元,離子電流的種類和外形都不同于前面的細(xì)胞,當(dāng)施加TTX阻斷鈉電流,并用TEA阻斷I<,K>之后,除了I<,A>之
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