白香丹對PMS肝氣逆證模型大鼠不同腦區(qū)GABA_B受體亞基分布表達及海馬ERK1-2信號通路的影響.pdf

1、目的:檢測PMS肝氣逆模型大鼠額區(qū)、頂區(qū)、海馬和下丘腦相關區(qū)域內(nèi)GABAB受體亞單位(GABABR1和GABABR2)分布表達及海馬ERK1/2信號通路相關蛋白的表達變化,初步探討PMS肝氣逆證發(fā)病的中樞機制,并研究白香丹膠囊對該病證的干預機制。
　　方法:通過曠場實驗、宏觀行為藥理學方法、陰道涂片法篩選健康雌性Wistar大鼠進入實驗,采用電刺激應激法復制PMS肝氣逆證大鼠模型,以曠場實驗結(jié)合宏觀行為藥理學評價模型,用免疫熒光雙

2、標記技術檢測GABABR1和GABABR2在正常對照組大鼠、PMS肝氣逆模型組大鼠、白香丹給藥組大鼠、巴氯芬給藥組大鼠額區(qū)、頂區(qū)、海馬CA1、CA3和下丘腦中的分布表達,計算平均熒光強度(IMF),并以免疫印記技術檢測ERK1/2、P-ERK1/2在以上四組大鼠海馬中的表達水平,計算P-ERK1/2在ERK1/2中的百分比。
　　結(jié)果:與正常組大鼠相比,模型組大鼠垂直得分、水平得分和總分均顯著性增加(P＜0.01),大鼠表現(xiàn)出緊張

3、警覺,環(huán)顧四周,對外界刺激敏感的狀態(tài);而造模并給予藥物治療的大鼠較模型組曠場實驗三項得分均顯著降低(P＜0.05或P＜0.01)。免疫熒光雙標記結(jié)果顯示,與正常組大鼠相比,模型組大鼠額區(qū)、頂區(qū)、海馬CA1、CA3、下丘腦GABABR1和GABABR2表達水平顯著降低(P＜0.01);與模型組大鼠相比,白香丹組和巴氯芬組大鼠GABABR1和GABABR2蛋白在以上區(qū)域的表達水平明顯上升(P＜0.01或P＜0.05),但兩組之間沒有顯著性差

4、異(P＞0.05)。免疫印記結(jié)果顯示,與正常組大鼠相比,模型組大鼠海馬中P-ERK1/2表達水平下降(P＜0.01);與模型組大鼠相比,白香丹和巴氯芬給藥后大鼠P-ERK1/2水平有所上升(P＜0.01),且白香丹組與巴氯芬組相比有顯著性差異(P＜0.01)。
　　結(jié)論:電刺激應激造模法可以成功制備PMS肝氣逆證大鼠模型;PMS肝氣逆證的發(fā)生可能與大鼠頂區(qū)、額區(qū)、海馬CA1、CA3、下丘腦GABAB受體亞單位蛋白以及海馬中P-ER