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1、背景和目的:低氧血癥是眾多新生兒疾病中常見(jiàn)的臨床表現(xiàn),氧療是其主要的治療方法。常壓高氧在治療低氧血癥同時(shí)也引起多組織的高氧性損傷,其中腦、肺、眼是最容易受損傷的臟器。cGMP作為腦內(nèi)第二信使參與鈉尿肽-鈉尿肽受體-cGMP信號(hào)途徑是生成胞內(nèi)cGMP的重要途徑,而已證實(shí)在腦中存在鈉尿肽受體的分布。盡管已證實(shí),ANP具有改善腦水腫,降低腦損傷后血腦屏障通透性的作用。但是鈉尿肽受體髙氧性腦損傷中的變化尚不清楚。因此,本文就鈉尿肽受體-cGMP
2、途徑在高氧性腦損傷中的作用及表達(dá)變化進(jìn)行了研究。
方法:建立高濃度氧腦損傷模型。取新生1日齡新生大鼠,機(jī)分為高氧實(shí)驗(yàn)組和空氣對(duì)照組。高氧組置于氧箱中持續(xù)輸入氧氣,氧濃度維持在(80.0±5.O)%,用鈣石灰吸收C02,溫度25-26℃,濕度60%-70%,每天開(kāi)箱1h,喂水及飼料,更換墊料。從造模開(kāi)始后的1,3和7天分別取出小鼠進(jìn)行麻醉,取腦組織固定或凍存,利用HE染色,電鏡觀察各組新生大鼠大腦形態(tài)學(xué)變化,免疫組化和weste
3、rn blot檢測(cè)大腦NPR-A/B蛋白表達(dá)水平;以及ELISA檢測(cè)大腦組織cGMP的表達(dá)情況。
結(jié)果:
1.HE染色觀察正常大鼠海馬組織主體細(xì)胞形態(tài)正常,高氧1天組大鼠海馬錐體細(xì)胞排列欠整齊,細(xì)胞脫失,細(xì)胞核體積變小,呈核固縮。高氧3天組大鼠海馬錐體細(xì)胞排列紊亂,細(xì)胞脫失明顯,高氧7天組海馬組織明顯水腫,海馬錐體細(xì)胞排列紊亂,細(xì)胞核僅呈很淡的藍(lán)色甚至藍(lán)色消失。
2.電鏡下觀察正常組海馬形態(tài)基本正常;高氧3
4、天組線粒體雙層膜結(jié)構(gòu)不清,部分嵴斷裂及消失,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脫顆粒,突觸數(shù)量及小泡數(shù)量減少;高氧7天,線粒體雙層膜結(jié)構(gòu)被破壞,線粒體數(shù)量減少,突觸數(shù)量明顯減少,突觸致密物密度降低。
3.利用免疫組化法觀察海馬組織中NPR A/B的表達(dá)結(jié)果顯示,正常組大鼠海馬區(qū)NPR-A/B表達(dá),呈棕黃色顆粒,彌漫或顆粒狀分布。高氧組大鼠海馬區(qū)同樣棕黃色顆粒,彌漫或顆粒狀分布。高氧組與正常組NPR- B蛋白表達(dá)相比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.但是高氧組中N
5、PR-A蛋白表達(dá)情況明顯高于正常組中的表達(dá)情況,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
4.Western blot結(jié)果顯示,高氧組NPR-A表達(dá)量明顯高于正常組,而NPR-B的表達(dá)量無(wú)明顯變化。
5.ELISA檢測(cè)結(jié)果表明髙氧腦組織cGMP濃度增高,與空氣對(duì)照組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)論:1.髙氧性腦損傷中NPR-A表達(dá)量升高,但NPR-B無(wú)顯著性變化。2.髙氧性腦損傷腦組織中cGMP含量的增高,與NPR-A表達(dá)增高有關(guān),
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