rhG-CSF對新生缺氧缺血腦損傷大鼠腦組織NgR表達的影響.pdf

1、目的：缺氧缺血性腦病是新生兒的常見疾病，可導致永久性神經(jīng)系統(tǒng)損傷甚至死亡，但目前尚無有效的治療方法。rhG-CSF是一種造血生長因子，可以通過血腦屏障，發(fā)揮神經(jīng)保護作用。本研究通過制作缺氧缺血性腦損傷模型，觀察不同時間點兩種劑量rhG-CSF干預對腦組織NgR表達的影響，進一步揭示rhG-CSF的神經(jīng)保護作用，為新生兒缺氧缺血性腦病的臨床治療提供動物實驗依據(jù)。
　　方法：新生7日齡SD大鼠隨機分成四組：Ⅰ組：假手術(shù)組；Ⅱ組：HIB

2、D模型組；Ⅲ組：小劑量組；Ⅳ組：大劑量組；每組24只。Ⅰ組只分離左側(cè)頸總動脈，余不作任何處理。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ三組根據(jù)Rice法，制作HIBD模型。Ⅲ、Ⅳ組分別于造模后即刻頸部皮下注射rhG-CSF50μg/kg、100μg/kg，每日一次，連續(xù)7d；Ⅱ組造模后頸部皮下注射等量生理鹽水。四組于造模后24h、72h、7d及14d，取腦組織作 HE染色、免疫組化及實時熒光定量 PCR檢測腦組織病理變化、NgR蛋白及NgR mRNA的表達。

3、　　結(jié)果：（1）行為能力：Ⅰ組無行為異常；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ三組在造模過程中均出現(xiàn)行為異常。（2）腦組織外觀：Ⅰ組各時間點形態(tài)正常；Ⅱ組在各時間點左腦出現(xiàn)不同程度的異常改變；Ⅲ、Ⅳ組24h左腦稍水腫，余時間點大體形態(tài)基本正常。（3） HE染色：Ⅰ組各時間點大腦皮層細胞排列整齊，腦組織結(jié)構(gòu)層次清楚；Ⅱ組各時間點大腦皮層細胞均出現(xiàn)不同程度的病理改變；Ⅲ、Ⅳ組各時間點病理改變較Ⅱ組明顯減輕。（4）免疫組化：Ⅰ組各時間點大腦皮層可見NgR蛋白呈基礎性表

4、達；與Ⅰ組相比，Ⅱ組各時間點NgR的表達均明顯增加，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)；Ⅲ組24h、72h和Ⅳ組24h大腦皮層可見明顯的NgR表達，但比Ⅱ組輕；與Ⅱ組相比，Ⅲ組7d、14d及Ⅳ組72h、7d、14dNgR表達均明顯下降，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.01）。（5）實時熒光定量PCR：與Ⅰ組相比，Ⅱ組各時間點NgR mRNA表達量均有顯著性差異（P＜0.05），且呈增加趨勢；Ⅲ組24h、72h和Ⅳ組24h，與Ⅱ組相比無差異（