rhG-CSF動(dòng)員骨髓干細(xì)胞治療大鼠缺血性腦梗死.pdf

1、目的： 1探討基因重組人粒細(xì)胞集落刺激因子(rhG-CSF商品名惠爾血)動(dòng)員骨髓干細(xì)胞向缺血性腦梗死大鼠模型的遷移及其在特定的病理環(huán)境中分化的情況。 2 探討基因重組人粒細(xì)胞集落刺激因子動(dòng)員骨髓干細(xì)胞治療大鼠缺血性腦梗死在形態(tài)和功能方面的改變，以觀察其保護(hù)神經(jīng)修復(fù)梗死的腦組織的治療作用。 方法：選擇符合實(shí)驗(yàn)要求清潔級(jí)的SD大鼠，隨機(jī)分為治療組，對(duì)照組和假手術(shù)組，每組32只。治療組和對(duì)照組均用線(xiàn)栓法復(fù)制大鼠腦缺血模型，假手

2、術(shù)組僅暴露右側(cè)頸總動(dòng)脈，頸內(nèi)動(dòng)脈和頸外動(dòng)脈，不插線(xiàn)阻斷血流，治療組于復(fù)制缺血腦梗死模型后1小時(shí)皮下注射rhG-CSF10 μ g/k g/d，連用5天；對(duì)照組于術(shù)后皮下注射等量的生理鹽水。3組大鼠分別在MCAO術(shù)后48小時(shí)，分別取10只心臟灌注取腦，免疫組化檢測(cè)CD34．陽(yáng)性細(xì)胞；術(shù)后2周各取10只斷顱取腦，TTC染色后檢測(cè)腦梗死的體積，各取10只分別于術(shù)前，術(shù)后1周，術(shù)后3周檢測(cè)體重及體感誘發(fā)電位；分別取2只于術(shù)后1個(gè)月進(jìn)行電鏡觀察。

3、 結(jié)果： 1復(fù)制大鼠腦梗死模型后，大鼠活動(dòng)明顯減少，并出現(xiàn)不同程度運(yùn)動(dòng)障礙，體重減輕，假手術(shù)組無(wú)以上改變，術(shù)后1周治療組體重減輕率(15.44±8.97)﹪，對(duì)照組則為(14.44±6.32)﹪，兩者無(wú)顯著性差異(P>0.05)。2術(shù)后2周各組大鼠腦組織TTC染色結(jié)果：1)在假手術(shù)組腦組織都被染成紅色；2)治療組和對(duì)照組腦梗死體積恒定于右側(cè)大腦中動(dòng)脈(MCA)供血區(qū)，包括大腦皮層及基底節(jié)大鼠腦組織區(qū)，假手術(shù)組無(wú)梗死區(qū)；TTC染色

4、檢查對(duì)照組在右半腦出現(xiàn)邊界清晰的，范圍恒定的蒼白梗死灶，圖像分析結(jié)果顯示：治療組梗死灶體積為(24.84±6.28)﹪，對(duì)照組則為(35.85±5.79)﹪，兩者的差異顯著(P<0.01)。3治療組和對(duì)照組大鼠體感誘發(fā)電位各項(xiàng)指標(biāo)與術(shù)前有很大差別；同時(shí)治療組在兩個(gè)時(shí)相點(diǎn)(1周和3周)也有明顯的好轉(zhuǎn)，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：P1和NI潛伏期測(cè)定結(jié)果MCAO術(shù)前，各組大鼠P1和NI潛伏期差異均無(wú)明顯性意義(P>0.05)；假手術(shù)組大鼠，于手術(shù)后各時(shí)相點(diǎn)

5、P1和NI潛伏期均無(wú)明顯改變(P>0.05)；治療組和對(duì)照組大鼠，于MCAO術(shù)后，P1和NI潛伏期明顯延長(zhǎng)(P<0.01)，但動(dòng)員治療組大鼠，在治療后其P1和NI潛伏期逐漸恢復(fù)，第3周始Pl和NI潛伏期明顯縮短，與治療前相比差異有非常顯著性意義(p<0.01);治療組第3周始，P1和NI潛伏期與MCAO術(shù)前相比差異無(wú)顯著性意義(p>0.05)，與對(duì)照組大鼠相比差異有顯著性意義(P<0.05)。4 rhG-CSF治療組一個(gè)月后的梗死區(qū)神經(jīng)

6、元胞漿中出現(xiàn)了豐富的游離核糖體，出現(xiàn)單個(gè)核細(xì)胞，并可見(jiàn)巨噬細(xì)胞增多，而對(duì)照組大鼠腦梗死區(qū)神經(jīng)胞核固縮，變性并有嗜神經(jīng)現(xiàn)象。5術(shù)后48h，，rhG-CSF治療組大鼠的手術(shù)側(cè)腦組織中檢測(cè)到CD34陽(yáng)性的單個(gè)核細(xì)胞，對(duì)側(cè)腦組織及對(duì)照組，假手術(shù)組大鼠的腦組織無(wú)此類(lèi)細(xì)胞。 結(jié)論： rhG-CSF可減輕大鼠缺血性腦梗死程度，減少腦梗死體積，其機(jī)理可能是rhG-CSF對(duì)缺血神經(jīng)元具有保護(hù)作用，并動(dòng)員自體骨髓干細(xì)胞，促進(jìn)腦組織的再生與修復(fù)，故可