脂肪乳對(duì)布比卡因神經(jīng)毒性大鼠腦內(nèi)NMDA受體和GABAA受體表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　擬探究脂肪乳（LE）在布比卡因致大鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)毒性模型中對(duì)NMDA受體和GABAA受體表達(dá)的影響，確定LE是否通過(guò)調(diào)節(jié)腦內(nèi)NMDA受體和GABAA受體減輕布比卡因所致中樞毒性。
　　方法：
　　1.體重280g-320g健康雄性SD大鼠20只，隨機(jī)分為2組：布比卡因+生理鹽水組（BPV+NS組）、布比卡因+脂肪乳（BPV+LE組），制備布比卡因致大鼠驚厥模型后，兩組即刻經(jīng)尾靜脈泵注相應(yīng)后處理藥物，在給予N

2、S或LE后3min、5min、10min、20min、30min、40min、50min、1h均對(duì)大鼠進(jìn)行Tarlov神經(jīng)功能評(píng)分；
　　2.上述健康SD大鼠54只，隨機(jī)分為3組：假手術(shù)組（sham組）、BPV+NS組、BPV+LE組，后兩組制備布比卡因致大鼠驚厥模型后分別泵注相應(yīng)后處理藥物，sham組則泵注等體積生理鹽水。在藥物輸注結(jié)束后的不同時(shí)間點(diǎn)（10min、30min、1h、2h、6h、12h）每組各隨機(jī)選擇3只大鼠斷頭取

3、出兩側(cè)海馬組織，采用高效液相色譜法檢測(cè)其谷氨酸含量；
　　3.參考氨基酸檢測(cè)結(jié)果，我們得知：于輸注后處理藥物結(jié)束后6h取材的大鼠谷氨酸含量較有意義。將上述健康SD大鼠18只隨機(jī)分為sham組、BPV+NS組、BPV+LE組，造模及給藥同上，所有動(dòng)物在藥物輸注完畢后6h斷頭取出腦組織，采用免疫組化法檢測(cè)海馬組織鈣調(diào)蛋白（CaM）的陽(yáng)性染色面積，Western Blot檢測(cè)其N(xiāo)MDA受體及GABAA受體的表達(dá)；
　　4.上述健康

4、SD大鼠21只隨機(jī)分為7組：sham組、BPV+NS組、BPV+LE組、布比卡因+生理鹽水+MK-801組（BPV+NS+MK-801組）、布比卡因+脂肪乳+MK-801組（BPV+LE+MK-801組）、布比卡因+生理鹽水+L-NAME組（BPV+NS+L-NAME組）、布比卡因+脂肪乳+L-NAME組（BPV+LE+L-NAME組），造模及給藥同上，后四組在輸注相應(yīng)后處理藥物結(jié)束后1h腹腔注射MK-801或L-NAME，所有動(dòng)物在靜

5、脈藥物輸注完畢后6h斷頭取腦，采用Western Blot檢測(cè)其海馬組織nNOS活性。
　　結(jié)果：
　　1.BPV+LE組在給予后處理藥物后3、5、10min三個(gè)時(shí)間點(diǎn)的Tarlov評(píng)分高于BPV+NS組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；
　　2.造模后1h、2h、6h取材的大鼠，BPV+NS組谷氨酸含量高于BPV+LE組（P<0.05），其中6h取材的BPV+NS組谷氨酸含量最高且與同時(shí)間點(diǎn)取材的BPV+LE組之間

6、有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；
　　3.造模后6h取材的大鼠中，與BPV+NS組比較，BPV+LE組CaM陽(yáng)性染色面積減少（P<0.05）,BPV+LE組NMDA受體表達(dá)明顯降低（P<0.01），GABAA受體表達(dá)增高（P<0.05）；
　　4.與sham組比較，BPV+NS+MK-801組、BPV+LE+MK-801nNOS組活性增高（P<0.05）；與BPV+NS組比較，BPV+NS+MK-801組nNOS活性增高（P<0.05）；