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1、目的:通過觀察針刺對(duì)SAMP8小鼠海馬神經(jīng)元突觸可塑性及NR2A、NR2B表達(dá)的影響,研究針刺對(duì) NMDA受體的影響,從 NMDA受體角度探討針刺促突觸可塑性發(fā)揮、改善學(xué)習(xí)記憶、治療AD的調(diào)控機(jī)制,為針灸促神經(jīng)康復(fù)的可塑性機(jī)制提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:以雄性9月齡快速老化模型小鼠(SAMP8)作為AD動(dòng)物模型,利用Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)篩選出學(xué)習(xí)記憶能力下降的SAMP8小鼠,并將其隨機(jī)分為P8針刺組和P8對(duì)照組;抗快速老化模型
2、小鼠(SAMR1)作為R1對(duì)照組。其中P8針刺組被予以針刺―百會(huì)‖、―涌泉‖,每日一次,7日一療程,療程間隔2天,共4療程。相應(yīng)方法取材后,用透射電鏡結(jié)合體視學(xué)測(cè)量方法觀測(cè)小鼠 CA1區(qū)海馬神經(jīng)元突觸界面曲率、突觸間隙寬度、突觸后致密物(PSD)厚度等突觸界面超微結(jié)構(gòu)參數(shù)。用Western Blot蛋白質(zhì)免疫印跡法結(jié)合圖像分析方法檢測(cè)小鼠海馬神經(jīng)元NR2A、NR2B的蛋白表達(dá)及NR2A/NR2B比值變化。
結(jié)果:
1
3、.學(xué)習(xí)記憶能力基線分析結(jié)果:P8針刺組和 P8對(duì)照組小鼠定位航行實(shí)驗(yàn)平均逃避潛伏期較 R1對(duì)照組延長(zhǎng)、游泳總路程較 R1對(duì)照組增加;空間探索實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)象限游泳時(shí)間百分比較R1對(duì)照組減低、穿越平臺(tái)次數(shù)較R1對(duì)照組減少。P8針刺組與P8對(duì)照組之間各參數(shù)未見差異。
2.透射電鏡檢測(cè)結(jié)果:針刺治療結(jié)束后,P8對(duì)照組小鼠CA1區(qū)海馬神經(jīng)元突觸界面曲率較R1對(duì)照組下降、突觸間隙較R1對(duì)照組增寬、PSD厚度較R1對(duì)照組變薄。P8針刺組小鼠CA
4、1區(qū)海馬神經(jīng)元突觸界面曲率較P8對(duì)照組增大、突觸間隙較P8對(duì)照組變窄、PSD厚度較P8對(duì)照組增厚。
3. Western Blot檢測(cè)結(jié)果:針刺治療結(jié)束后,與R1對(duì)照組比較,P8對(duì)照組小鼠海馬神經(jīng)元NR2A相對(duì)表達(dá)含量呈增高趨勢(shì),NR2B相對(duì)表達(dá)含量呈降低趨勢(shì),NR2A/NR2B比值呈增高趨勢(shì);與P8對(duì)照組比較,P8針刺組小鼠海馬神經(jīng)元NR2A相對(duì)表達(dá)含量呈下降趨勢(shì),NR2B相對(duì)表達(dá)含量呈上升趨勢(shì),NR2A/NR2B比值呈下降
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