鴉膽子油交聯(lián)環(huán)糊精包合物生物藥劑學(xué)實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、中藥鴉膽子系苦木科鴉膽子屬植物鴉膽子(Brucea javanica(L.) Merr.)的干燥成熟果實(shí)。鴉膽子油(BJO)為鴉膽子的藥效成分，具有抗腫瘤、抑菌、抗病毒、抗胃潰瘍、降脂降壓、抑制血酸形成等藥理作用。目前已上市的鴉膽子油劑型主要有鴉膽子油口服乳液、鴉膽子油乳注射液以及鴉膽子油軟膠囊。鴉膽子油的藥理藥效明確，但現(xiàn)有劑型較少，難以滿足臨床用藥需求，因此亟需開發(fā)出良好的鴉膽子油新劑型尤其是口服制劑。本實(shí)驗(yàn)考察了BJO-CDP灌胃

2、后，BJO中指標(biāo)成分鴉膽子苦醇在動(dòng)物體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)行為和組織分布，自制BJO-CDP與市售鴉膽子油乳劑生物等效性以及BJO-CDP口服給藥的急性毒性，為開發(fā)鴉膽子油口服制劑并有效應(yīng)用于臨床提供基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)依據(jù)。主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:
　　1.建立生物樣品中鴉膽子苦醇的HPLC測定方法
　　色譜條件:色譜柱:SymmetryC18(5μm，4.6×250 mm);流動(dòng)相:甲醇-水，等度洗脫:甲醇:水=5∶5;柱溫∶25℃;流速∶0

3、.8ml/mim檢測波長:220 nm;進(jìn)樣量:40μl。以石油醚為萃取溶劑，鴉膽子苦醇在血漿、各組織勻漿液中的平均回收率大于80％，精密度RSD均小于5％，穩(wěn)定性及在19.2～1536 ng/ml濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(R2＞0.999)。
　　2.BJO-CDP藥動(dòng)學(xué)及組織分布研究
　　大鼠灌胃給藥三組劑量BJO-CDP溶液(5g/kg、2g/kg、1g/kg)，測定血液中鴉膽子苦醇濃度隨時(shí)間變化關(guān)系，考察其在大鼠體內(nèi)藥

4、動(dòng)學(xué)特征。結(jié)果表明，鴉膽子苦醇在大鼠體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)特征符合二室模型，三組劑量平均血藥峰濃度(Cmax)分別為:（593.869±53.381）ng/ml、（360.244±31.255）ng/ml、（262.293±26.57）ng/ml;分別于給藥后（3.6±0.548）、（3.4±0.548）h、（3.8±0.447）h達(dá)到峰值;吸收半衰期（t1/2ka）分別為:（1.151±0.693）h、（1.163±0.338）h、（1.5±

5、0.288）h，分布半衰期(t1/2a)分別為:（2.649±1.001）h、（5.479±6.298）h、（2.605±1.152）h，消除半衰期(t1/2β)分別為:（41.057±31.116）h、（46.547±31.322）h、（56.373±28.939）h;濃度-時(shí)間曲線下面積(AUC0-t)分別為:(5267.556±248.833) ng/ml·h、(3214.986±74.704) ng/ml·h、(2212.106

6、±186.25) ng/ml·h,總消除率(CL)分別為:(916.001±67.519)L/h/kg、(572.48±45.724)L/h/kg和（415.256±35.603）L/h/kg。
　　小鼠灌胃給藥最大體積最大濃度BJO-CDP溶液，測定心、肝、脾、肺、腎、腸、胃中鴉膽子苦醇濃度隨時(shí)間變化關(guān)系，考察其在小鼠組織分布情況。結(jié)果表明，灌胃后鴉膽子苦醇在小鼠各組織中均有分布，其中肝、肺、腎、腸和胃中分布較多，心臟和脾臟中分

7、布較少。
　　3.自制BJO-CDP與市售鴉膽子油乳劑生物等效性評價(jià)
　　本試驗(yàn)對自制BJO-CDP及市售鴉膽子油乳劑進(jìn)行了生物等效性評價(jià)，分別對主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)Cmax Tmax、AUC采用方差分析、雙單側(cè)t檢驗(yàn)及(1-2α)％置信區(qū)間的方法進(jìn)行等效性統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，結(jié)果顯示兩種制劑在大鼠體內(nèi)不具有生物等效性。但由兩制劑藥動(dòng)學(xué)參數(shù)Cmax、Tmax、AUC及相對生物利用度可知，自制BJO-CDP生物利用度明顯優(yōu)于市售鴉膽子油乳劑

8、。以曲線下面積AUC0-t計(jì)算的相對生物利用度F為168.609％;以AUC0-∞計(jì)算的相對生物利用度F為172.387％。
　　4.BJO-CDP急性毒性試驗(yàn)
　　小鼠灌胃給予最大體積(0.4 ml/10g)、最大濃度（83mg/ml）的BJO-CDP溶液，給藥14天內(nèi)，小鼠的攝食、飲水、外觀體征及活動(dòng)情況無異常改變，體重增長正常，未出現(xiàn)小鼠死亡例，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后處死小鼠并解剖觀察，未見臟器異常，切片觀察，未見臟器有病理改變。

9、
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:①本文所建立的鴉膽子苦醇HPLC測定方法專屬性好、準(zhǔn)確度高，穩(wěn)定性好，可用于鴉膽子油的藥動(dòng)學(xué)和組織分布研究;②鴉膽子苦醇在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)符合二室模型，0.5 h后即可在血液中檢測到鴉膽子苦醇，tmax為4h左右，之后血藥濃度開始下降，24 h后高、中、低劑量組濃度分別為(53.8±8.91) ng/ml、(34.3±11.75) ng/ml、(25.9±10.90) ng/ml，Cmax和AUC都與劑量呈明顯