拉曼光譜技術(shù)在腫瘤鑒別與異物定性中的應(yīng)用研究.pdf

1、目的：
　　結(jié)合拉曼光譜技術(shù)在生物醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用情況，本實(shí)驗(yàn)擬應(yīng)用拉曼光譜技術(shù)鑒別課題組迪夫染色的循環(huán)腫瘤細(xì)胞（Circulating Tumor Cells，CTCs）與外周血淋巴細(xì)胞；鑒別瑞氏-姬姆薩染色的腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞；鑒別肝癌細(xì)胞系與外周血淋巴細(xì)胞；鑒別肝癌癌組織與合并肝硬化肝組織以及鑒定膈肌異物。
　　方法：
　　本文運(yùn)用拉曼光譜技術(shù)在細(xì)胞層面分析了迪夫染液樣本中CTCs、CTCs旁淋巴細(xì)胞及樣本中濾膜、染

2、料、玻片等的拉曼光譜；瑞氏-姬姆薩染色樣本中的腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞的拉曼光譜；肝癌細(xì)胞系與正常人外周血白細(xì)胞的拉曼光譜。在組織層面分析了30例肝癌手術(shù)患者的肝癌癌組織與合并肝硬化肝組織的拉曼光譜。在臨床案例中分析了腫物中異物的拉曼光譜。
　　結(jié)果：
　　通過(guò)分析各樣本拉曼光譜，結(jié)果顯示：1）在細(xì)胞層面，532 nm波長(zhǎng)激光下經(jīng)迪夫染色的CTCs、淋巴細(xì)胞及染料的拉曼光譜在209~213 cm-1、273~278 cm-1、33

3、6~338 cm-1等峰位處都有類似特征峰；785 nm波長(zhǎng)激光下經(jīng)迪夫染色的腫瘤細(xì)胞、濾膜與玻片的拉曼光譜在1200~2000 cm-1區(qū)域都存在高聳的熒光峰，在1200 c m-1以前區(qū)域，631~632 c m-1、701~702 cm-1、883~887 cm-1、1106~1107 c m-1處鼻咽癌細(xì)胞與濾膜有拉曼特征峰，而空白玻片呈光滑曲線。在532 nm波長(zhǎng)激光下經(jīng)瑞氏-姬姆薩染色的腫瘤細(xì)胞與淋巴細(xì)胞在208~215 c

4、m-1、278~285 c m-1、336~341 c m-1等峰位附近都有類似特征峰而染料由于染色較淺除在峰位640~643 c m-1、708~713 c m-1、1500~1505 c m-1、1620~1624 cm-1處拉曼特征峰峰強(qiáng)較高外，其余峰強(qiáng)均較低。白細(xì)胞與細(xì)胞周圍基底的拉曼光譜曲線平緩，沒有顯著的特征峰；而肝癌細(xì)胞在峰位1003 cm-1、1449 cm-1、1666 cm-1附近可見顯著特征峰。2）組織層面，從肝癌

5、癌組織與合并肝硬化肝組織的拉曼光譜對(duì)比圖可以看出：在峰位1004 c m-1、1155 c m-1、1510 c m-1附近合并肝硬化肝組織的峰強(qiáng)高于肝癌癌組織；在峰位1642 c m-1附近合并肝硬化肝組織的峰強(qiáng)低于肝癌癌組織；在1377 c m-1和1586 cm-1附近肝癌癌組織有顯著特征峰而合并肝硬化的肝組織沒有。3）在臨床案例中，從膈肌異物、中人氟安及氟尿嘧啶注射液的拉曼光譜可以看出在412 c m-1、687 c m-1、1

6、344 c m-1、1538 c m-1、2876 c m-1等處都有明顯特征峰且高度大致相同。
　　結(jié)論：
　　通過(guò)拉曼光譜技術(shù)分析迪夫染色樣本與瑞氏-姬姆薩染色樣本的拉曼光譜可見通過(guò)染色后的樣本由于染料等因素的干擾用拉曼光譜技術(shù)是無(wú)法鑒別的，通過(guò)對(duì)未染色樣本肝癌細(xì)胞系與人外周血淋巴細(xì)胞拉曼光譜的分析可見運(yùn)用拉曼光譜技術(shù)鑒別腫瘤細(xì)胞與淋巴細(xì)胞是可行的。通過(guò)對(duì)30例肝癌癌組織與合并肝硬化肝組織拉曼光譜的對(duì)比可以看出，運(yùn)用拉曼