拉曼光譜技術在腫瘤鑒別與異物定性中的應用研究.pdf

1、目的：
　　結合拉曼光譜技術在生物醫(yī)學中的應用情況，本實驗擬應用拉曼光譜技術鑒別課題組迪夫染色的循環(huán)腫瘤細胞（Circulating Tumor Cells，CTCs）與外周血淋巴細胞；鑒別瑞氏-姬姆薩染色的腫瘤細胞與正常細胞；鑒別肝癌細胞系與外周血淋巴細胞；鑒別肝癌癌組織與合并肝硬化肝組織以及鑒定膈肌異物。
　　方法：
　　本文運用拉曼光譜技術在細胞層面分析了迪夫染液樣本中CTCs、CTCs旁淋巴細胞及樣本中濾膜、染

2、料、玻片等的拉曼光譜；瑞氏-姬姆薩染色樣本中的腫瘤細胞與正常細胞的拉曼光譜；肝癌細胞系與正常人外周血白細胞的拉曼光譜。在組織層面分析了30例肝癌手術患者的肝癌癌組織與合并肝硬化肝組織的拉曼光譜。在臨床案例中分析了腫物中異物的拉曼光譜。
　　結果：
　　通過分析各樣本拉曼光譜，結果顯示：1）在細胞層面，532 nm波長激光下經(jīng)迪夫染色的CTCs、淋巴細胞及染料的拉曼光譜在209~213 cm-1、273~278 cm-1、33

3、6~338 cm-1等峰位處都有類似特征峰；785 nm波長激光下經(jīng)迪夫染色的腫瘤細胞、濾膜與玻片的拉曼光譜在1200~2000 cm-1區(qū)域都存在高聳的熒光峰，在1200 c m-1以前區(qū)域，631~632 c m-1、701~702 cm-1、883~887 cm-1、1106~1107 c m-1處鼻咽癌細胞與濾膜有拉曼特征峰，而空白玻片呈光滑曲線。在532 nm波長激光下經(jīng)瑞氏-姬姆薩染色的腫瘤細胞與淋巴細胞在208~215 c

4、m-1、278~285 c m-1、336~341 c m-1等峰位附近都有類似特征峰而染料由于染色較淺除在峰位640~643 c m-1、708~713 c m-1、1500~1505 c m-1、1620~1624 cm-1處拉曼特征峰峰強較高外，其余峰強均較低。白細胞與細胞周圍基底的拉曼光譜曲線平緩，沒有顯著的特征峰；而肝癌細胞在峰位1003 cm-1、1449 cm-1、1666 cm-1附近可見顯著特征峰。2）組織層面，從肝癌

5、癌組織與合并肝硬化肝組織的拉曼光譜對比圖可以看出：在峰位1004 c m-1、1155 c m-1、1510 c m-1附近合并肝硬化肝組織的峰強高于肝癌癌組織；在峰位1642 c m-1附近合并肝硬化肝組織的峰強低于肝癌癌組織；在1377 c m-1和1586 cm-1附近肝癌癌組織有顯著特征峰而合并肝硬化的肝組織沒有。3）在臨床案例中，從膈肌異物、中人氟安及氟尿嘧啶注射液的拉曼光譜可以看出在412 c m-1、687 c m-1、1

6、344 c m-1、1538 c m-1、2876 c m-1等處都有明顯特征峰且高度大致相同。
　　結論：
　　通過拉曼光譜技術分析迪夫染色樣本與瑞氏-姬姆薩染色樣本的拉曼光譜可見通過染色后的樣本由于染料等因素的干擾用拉曼光譜技術是無法鑒別的，通過對未染色樣本肝癌細胞系與人外周血淋巴細胞拉曼光譜的分析可見運用拉曼光譜技術鑒別腫瘤細胞與淋巴細胞是可行的。通過對30例肝癌癌組織與合并肝硬化肝組織拉曼光譜的對比可以看出，運用拉曼