內異癥患者內膜中NF-кBp65的表達及其與OPN相關性研究.pdf

1、目的：
　　1.探討NF-кBp65、OPN在正常內膜、內異癥患者在位內膜、異位內膜腺上皮細胞中的表達情況及兩者的相關性；
　　2.分析OPN基因沉默及質粒導入后NF-кBp65、OPN在內異癥患者在位內膜腺上皮細胞中表達的變化，進一步揭示二者在內異癥中的關系；
　　3.探討OPN基因沉默及質粒導入前后子宮內膜腺上皮細胞侵襲性的變化。
　　方法：
　　1.收集2013年1月至2013年12月于我院因EMs行

2、腹腔鏡手術并于術中或術后經病理科確診為子宮內膜異位癥患者35例作為病例組，其中分泌期18例，增生期17例。收集同年因行輸卵管絕育患者在位內膜30例作為對照組，其中分泌期15例，增生15例，采用免疫組化的方法分別檢測NF-кBp65、OPN蛋白的表達。
　　2.將內異患者在位內膜腺上皮細胞進行原代分離、培養(yǎng)，通過OPN siRNA及質粒干擾子宮內膜腺上皮細胞后經RT-PCR及western-blot檢測NF-кBp65、OPN mR

3、NA及蛋白表達的變化。
　　3.通過侵襲小室（Transwell）檢測OPN siRNA及質粒干擾前后子宮內膜腺上皮細胞侵襲性的變化。
　　結果：
　　1.免疫組化檢測結果顯示：⑴NF-кBp65、OPN蛋白主要表達于子宮內膜腺上皮細胞的胞漿中，少數于間質細胞、血管內皮細胞中表達，于內異癥在位、異位內膜中的表達明顯強于正常內膜，且內異癥在位內膜中的表達強于正常內膜,其差異均具有統(tǒng)計學意義（P均<0.05）；（2)NF-

4、кBp65蛋白在三組內膜的增生期與分泌期中的表達無明顯差異,不具有統(tǒng)計學意義（P均〉0.05)，而OPN蛋白在三組內膜分泌期的表達明顯高于增生期，且其差異具有統(tǒng)計學意義（P均<0.05），且二者在內異癥在位、異位內膜中的表達呈正相關(Pearson相關系數r在位=0.88和r異位=0.78，P均＜0.01)。
　　2.OPNsiRNA干擾后腺上皮細胞中NF-кBp65、OPNmRNA及蛋白的表達較干預前明顯下降，其差異具有統(tǒng)計學意

5、義（P均<0.05），OPN質粒導入后NF-кBp65、OPN mRNA及蛋白表達均明顯增高，其差異具有統(tǒng)計學意義（P均<0.05）。
　　3.OPNsiRNA干擾內異癥患者在位內膜原代腺上皮細胞后其侵襲性較干預前明顯降低，OPN質粒干預后其細胞侵襲性明顯增加，其差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　結論：
　　1.NF-кBp65、OPN在內異癥患者在位、異位內膜均呈高表達，且二者呈明顯正相關；
　　2.O