補腎活血中藥治療膝骨關節(jié)炎的循證、臨床及實驗研究.pdf

1、目的:
　　1.循證醫(yī)學研究
　　評價補腎活血中藥治療膝骨關節(jié)炎的有效性及安全性。
　　2.臨床研究
　　評價補腎活血中藥龍鱉膠囊治療膝骨關節(jié)炎的臨床療效、患者生活質量及安全性。
　　3.動物實驗研究
　　依據龍鱉膠囊對膝骨關節(jié)炎(KOA，Knee Osteoarthritis)大鼠的膝關節(jié)腫脹度及大鼠體重、臟器指數和關節(jié)滑膜、軟骨病理形態(tài)學的改善作用，觀察龍鱉膠囊對大鼠膝骨關節(jié)炎的治療作用;觀察龍鱉

2、膠囊對膝骨關節(jié)炎大鼠血清白細胞介素-1β(IL-1β)、白細胞介素-6(IL-6)、白細胞介素-10(IL-10)水平及膝關節(jié)病變組織中P38MAPK、NF-κB信號傳導通路中MEK-3/6、p38、ATF2、NF-κBp65和P-MEK-3/6、P-p38、P-ATF2、P-NF-κBp65表達水平的影響，進而探討龍鱉膠囊治療膝骨關節(jié)炎的可能作用機制。
　　方法:
　　1.循證醫(yī)學研究
　　計算機檢索中國生物醫(yī)學文獻

3、數據庫(CBM)、中國期刊全文數據庫(CNKI)、萬方資源數據庫、維普期刊數據庫、Pubmed、Embase和Cochrane Library中關于補腎活血中藥對比非甾體類抗炎藥(Nonsteroidal Anti-inflammatory Drugs，NSAIDs)治療膝骨關節(jié)炎的隨機對照試驗文獻。對納入研究的文獻采用Jadad量表和CochraneHandbook5.1評估文獻質量和偏倚性風險，采用軟件RevMan5.3.5進行數據

4、分析，并運用GRADE系統(tǒng)對本研究得到的證據進行質量評價。
　　2.臨床研究
　　采用簡單隨機對照將符合納入標準的88例患者，隨機分為龍鱉膠囊組44例和塞來昔布組44例，分別給予口服龍鱉膠囊和塞來昔布，兩組均以4周為觀察期，對兩組患者治療后的臨床療效、VAS評分、Lequesne指數、胃腸道不良反應及關節(jié)炎影響測定量表評分進行評價。
　　3.動物實驗研究
　　建立膝骨關節(jié)炎大鼠模型，于造模后開始給予低、中、高劑量

5、的龍鱉膠囊灌胃(0.3125，0.625，0.9375g·kg-1)，連續(xù)4周，觀察龍鱉膠囊對KOA大鼠的膝關節(jié)腫脹度及大鼠體重、臟器指數的影響，HE染色觀察光鏡下關節(jié)滑膜、軟骨的一般形態(tài)，并對滑膜組織的病理學進行評分，Masson染色觀察光鏡下關節(jié)軟骨的一般形態(tài)，并對軟骨進行Mankin's評分;ELISA法檢測血清白細胞介素-1β(IL-1β)、白細胞介素-6（IL-6）及白細胞介素-10(IL-10)水平，免疫組化SP法檢測滑膜和

6、軟骨組織中MEK-3/6、p38、ATF2、NF-κBp65和P-MEK-3/6、P-p38、P-ATF2、P-NF-κBp65的表達情況。
　　結果:
　　1.循證醫(yī)學研究
　　Meta分析提示:與NSAIDs相比，補腎活血中藥具有更高的總有效率(RR=1.10，95％CI[1.06，1.15]，P＜0.00001)和臨床控制率(RR=1.48，95％CI[1.19，1.84]，P=0.0003)，更低的胃腸道不良反

7、應(RR-0.18，95％CI[0.09，0.35]，P＜0.00001)。
　　GRADE證據質量評價提示:補腎活血中藥的總有效率高于NSAIDs（低質量證據），補腎活血中藥的臨床控制率高于NSAIDs（低質量證據），補腎活血中藥與NSAIDs在改善WOMAC評分、Lequesne指數、KSS評分、Lysholms評分和VAS評分方面無差異（極低質量證據），補腎活血中藥的胃腸道不良反應低于NSAIDs（低質量證據）。
　　

8、2.臨床研究
　　龍鱉膠囊組總有效率92.25％，塞來昔布組總有效率90.00％，兩組總有效率差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05)。與治療前比較，龍鱉膠囊組和塞來昔布組的VAS評分、Lequesne指數、關節(jié)炎影響測定量表評分均較前明顯改善，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。治療后組間比較，龍鱉膠囊組和塞來昔布組在VAS評分、Lequesne指數方面差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);龍鱉膠囊組的關節(jié)炎影響測定量表評分低于塞來昔布組

9、，差異有統(tǒng)計學意義。
　　3.動物實驗研究
　　造模后，造模組的膝關節(jié)腫脹度高于對照組。給藥2周后，與造模組及龍鱉低、高劑量組比較，龍鱉中劑量組的膝關節(jié)腫脹度消退較快。給藥3周后，龍鱉低、中、高劑量組的膝關節(jié)腫脹度消退均快于造模組，其中，龍鱉中劑量組的膝關節(jié)腫脹已消退至對照組水平。給藥4周后，與對照組比較，龍鱉低、中、高劑量組的膝關節(jié)腫脹度均已消退。
　　造模后，造模組的體重和胸腺指數低于對照組，造模組的脾臟指數與對照

10、組比較，差異有統(tǒng)計學意義。給藥2周后，龍鱉中劑量組的體重重于對照組;而龍鱉低、高劑量的體重與對照組比較，差異均無統(tǒng)計學意義。給藥4周后，龍鱉低、中、高劑量的體重均重于對照組，而龍鱉中劑量組的體重又重于龍鱉低、高劑量組。給藥2周后，各組之間的脾臟指數兩兩比較，差異均無統(tǒng)計學意義。給藥4周后，龍鱉低、中、高劑量組的脾臟指數均高于同期對照組和造模組。給藥2周后，龍鱉低、中、高劑量組的胸腺指數均高于同期造模組。給藥4周后，各組組間的胸腺指數比較

11、，差異無統(tǒng)計學意義。
　　給藥2周、4周后，龍鱉低、中、高劑量組的軟骨結構破壞程度和滑膜炎癥程度均較造模組輕，龍鱉低、中、高劑量組的膝關節(jié)滑膜組織病理評分值均低于造模組。給藥4周后，龍鱉中劑量組的膝關節(jié)滑膜組織病理評分值與龍鱉高劑量組比較，差異有統(tǒng)計學意義。給藥2周、4周后，龍鱉低、中、高劑量組的膝關節(jié)軟骨Mankin評分值均低于造模組，同期龍鱉低、中、高劑量組的膝關節(jié)軟骨Mankin評分值組間兩兩比較，差異均無統(tǒng)計學意義。

12、>　　造模后，造模組的IL-1β、IL-6水平均高于對照組，而IL-10水平低于對照組。給藥2周、4周后，造模組的IL-1β水平均高于同期對照組及龍鱉低、中、高劑量組;龍鱉低、中、高劑量組的IL-1β水平均高于同期對照組(P＜0.05);龍鱉中劑量組IL-1β水平均低于同期龍鱉低、高劑量組。給藥2周、4周后，造模組IL-6水平均高于同期對照組及龍鱉低、中、高劑量組;龍鱉低劑量組IL-6水平均低于同期龍鱉中、高劑量組。給藥2周后，龍鱉低、

13、中、高劑量組IL-6水平均高于對照組;給藥4周后，龍鱉膠囊低劑量組IL-6水平與對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。給藥2周、4周后，龍鱉低、中、高劑量組IL-10水平均高于同期對照組和造模組，而其中龍鱉中劑量組IL-10水平均高于同期龍鱉低、高劑量組。
　　在滑膜組織中，給藥2周、4周后，各組細胞均有MEK-3/6、p38、ATF2、NF-κBp65和P-MEK-3/6、P-p38、P-NF-κ Bp65陽性表達，其中

14、造模組MEK-3/6、p38、ATF2、NF-κBp65和P-MEK-3/6、P-p38、P-NF-κBp65陽性細胞百分比均高于對照組和龍鱉低、中、高劑量組。給藥2周、4周后，各組細胞均有P-ATF2弱陽性表達;2周后，造模組P-ATF2陽性細胞百分比高于對照組和龍鱉低、中、高劑量組;4周后，各組間P-ATF2陽性細胞百分比比較，差異均無統(tǒng)計學意義。
　　在軟骨組織中，給藥2周、4周后，各組細胞均有MEK-3/6、p38、NF-

15、κBp65和P-MEK-3/6、P-p38、P-NF-κBp65陽性表達，其中造模組MEK-3/6、p38、NF-κBp65和P-MEK-3/6、P-p38、P-NF-κBp65陽性細胞百分比均高于對照組，龍鱉低、中、高劑量組MEK-3/6、p38、NF-κBp65和P-MEK-3/6、P-p38、P-NF-κBp65陽性細胞百分比均低于造模組。給藥2周、4周后，各組細胞均有ATF2和P-ATF2弱陽性表達，且造模組ATF2和P-ATF

16、2陽性細胞百分比均高于對照組;給藥2周后，龍鱉低、中、高劑量組ATF2陽性細胞百分比均低于造模組;給藥4周后，龍鱉低、中、高劑量組ATF2陽性細胞百分比與造模組比較，差異無統(tǒng)計學意義;給藥2周、4周后，龍鱉低、中、高劑量組P-ATF2陽性細胞百分比均低于造模組。
　　結論:
　　1.循證醫(yī)學研究
　　補腎活血中藥是治療膝骨關節(jié)炎的有效方法，不良反應較少。由于納入文獻的樣本量較小、方法學質量不高，本研究的結論仍亟需更多高

17、質量的臨床隨機對照試驗予以支持。
　　2.臨床研究
　　采用龍鱉膠囊和塞來昔布治療膝骨關節(jié)炎，均可有效緩解癥狀、改善膝關節(jié)功能，具有良好的有效性和安全性;但龍鱉膠囊在改善生活質量方面優(yōu)于塞來昔布。
　　3.動物實驗研究
　　龍鱉膠囊能消除膝骨關節(jié)炎大鼠的膝關節(jié)腫脹，抑制造模引起的大鼠體重下降，增加膝骨關節(jié)炎大鼠的體重和脾臟指數，使造模降低的胸腺指數恢復至正常水平，可減輕膝骨關節(jié)炎大鼠軟骨結構破壞的范圍和嚴重程度，