腎細(xì)胞高滲脅迫保護(hù)的新機(jī)制——甘油三酯的潛在作用.pdf

1、滲透調(diào)節(jié)是細(xì)胞的最基礎(chǔ)生理活動(dòng)之一。然而，細(xì)胞在高滲脅迫條件下的適應(yīng)和保護(hù)機(jī)制仍然有很多未知的地方。 在本研究中，我們以mIMCD3細(xì)胞(小鼠腎內(nèi)髓質(zhì)收集管細(xì)胞)為模型，采用了Oil Red O(油紅)染色，化學(xué)測(cè)定和流式細(xì)胞等技術(shù)，初步探討了高滲脅迫對(duì)腎細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)穩(wěn)態(tài)的影響。我們發(fā)現(xiàn)，在mIMCD3細(xì)胞中，高滲脅迫處理(550-900 mOsmol/kg，NaCl)造成了胞內(nèi)甘油三酯的積累增加，進(jìn)而在胞內(nèi)聚集大量脂滴。選用AC

2、C(乙酰輔酶A羧化酶)和FASN(脂肪酸合酶)的化學(xué)抑制劑TOFA以及Cerulenin伴隨550 mOsmol/kg高滲共處理miMCD3細(xì)胞24h，可不同程度地降低高滲脅迫誘導(dǎo)的TG含量增加，并且可以造成該細(xì)胞在更高滲透壓脅迫下(900 mOsmol/kg)存活率顯著下降。這些結(jié)果提示我們，ACC和FASN這兩個(gè)脂肪酸合成的關(guān)鍵酶參與了高滲脅迫下TG積累增加的部分過(guò)程。同時(shí)，我們也證明了在mIMCD3細(xì)胞中，高滲脅迫誘導(dǎo)的TG積累增

3、加是一種保護(hù)性的效應(yīng)。 我們進(jìn)一步通過(guò)Western Blot和半定量RT-PCR的方法測(cè)定了和脂質(zhì)代謝相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子SREBP1(固醇調(diào)控元件結(jié)合蛋白1)，PPARγ(過(guò)氧化物酶增殖體激活受體γ)的蛋白水平以及這兩個(gè)轉(zhuǎn)錄因子的部分靶基因mRNA在高滲脅迫下的表達(dá)變化。出乎我們的意料，高滲700 mOsmol/kg處理24小時(shí)后，這些脂肪合成相關(guān)的重要轉(zhuǎn)錄因子蛋白和合成酶的mRNA表達(dá)水平與等滲對(duì)照組相比并沒(méi)有明顯的變化。這些結(jié)