雙鏈RNA依賴的蛋白激酶PKR激酶結(jié)構(gòu)域的結(jié)構(gòu)解析及PBK活性位點(diǎn)的初步研究.pdf

1、目的:
　　 RNA依賴性蛋白激酶PKR在先天免疫反應(yīng)、細(xì)胞生長、細(xì)胞分化、信號傳導(dǎo)和細(xì)胞凋亡中起著重要的作用。PKR的激活過程已經(jīng)被研究了很多年,但是仍然沒有統(tǒng)一的結(jié)論,為了進(jìn)一步認(rèn)識PKR的激活機(jī)制和亞基識別機(jī)制,我們進(jìn)行了以下實(shí)驗(yàn)。
　　 方法:
　　 應(yīng)用PET-28a載體表達(dá)了不同長度及突變位點(diǎn)的RNA依賴性蛋白激酶PKR,對其進(jìn)行純化,并用蛋白結(jié)晶的方法解析了突變形式的PKR激酶結(jié)構(gòu)域PKR-KD的晶

2、體結(jié)構(gòu)(分辨率達(dá)到了2.9(A)),通過超速離心實(shí)驗(yàn),電荷表面分布圖等方法解釋PKR-KD的二聚體狀態(tài)。
　　 結(jié)果:
　　 解析了突變形式的PKR激酶結(jié)構(gòu)域PKR-KD的晶體結(jié)構(gòu)(分辨率達(dá)到了2.9(A))。PKR-KD的整體結(jié)構(gòu)與前邊他人報道的是大體一致的,這個晶體結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)了一種典型的背靠背式二聚體形式和一種新詮釋的面對面式二聚體形式,通過超速離心分析實(shí)驗(yàn),電荷表面分布圖以及PKR-KD和eIF2α復(fù)合物的結(jié)構(gòu)模型都