蛋白激酶抑制劑的設(shè)計(jì)合成及其抗癌活性研究.pdf

1、人蛋白激酶由500多個(gè)激酶組成，負(fù)責(zé)磷酸化底物蛋白的絲氨酸殘基、蘇氨殘基或酪氨酸殘基，調(diào)控細(xì)胞內(nèi)的各種信號(hào)傳導(dǎo)過程。蛋白激酶活性異常已被證明與多種疾病相關(guān)，如癌癥、免疫系統(tǒng)疾病、神經(jīng)退行性疾病以及炎癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、糖尿病和動(dòng)脈粥樣硬化等。因此，蛋白激酶抑制劑特別是選擇性的蛋白激酶抑制劑具有很大的新藥開發(fā)潛力。
　　 鑒于許多天然的吲哚咔唑類類化合物，如staurosporine、K252a和Granulatimide

2、，屬于ATP-競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑，它們都是非選擇性的蛋白激酶抑制劑。在此，本論文結(jié)合基于結(jié)構(gòu)的藥物分子設(shè)計(jì)方法，通過點(diǎn)擊化學(xué)，構(gòu)建了一個(gè)新的分子骨架，以模擬天然的吲哚咔唑化合物。
　　 在最初的概念證明階段，本論文合成了23個(gè)新化合物，其中我們發(fā)現(xiàn)了一個(gè)苗頭化合物，該化合物在1mM濃度水平上表現(xiàn)出很強(qiáng)的腫瘤細(xì)胞抑制活性。為尋找該化合物的靶標(biāo)蛋白，篩選了124個(gè)激酶，該化合物表現(xiàn)出極高的選擇性，在500nM濃度時(shí)僅對(duì)其中四個(gè)激酶表現(xiàn)出明

3、顯的抑制活性。此外，我們測(cè)定了該化合物對(duì)這四個(gè)激酶的半抑制濃度并通過ATP-競(jìng)爭(zhēng)性實(shí)驗(yàn)證實(shí)了該化合物是ATP-競(jìng)爭(zhēng)性激酶抑制劑。最后，我們對(duì)其中四個(gè)化合物與GSK3-β結(jié)晶蛋白的對(duì)接進(jìn)行了研究，獲得了與實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)一致的計(jì)算結(jié)果。
　　 在苗頭化合物的基礎(chǔ)長(zhǎng)，我們用二唑片段替代三唑片段，合成了3個(gè)吡唑馬來酰亞胺衍生物和3個(gè)咪唑馬來酰亞胺衍生物。MTT結(jié)果顯示，吡唑馬來酰亞胺衍生物的腫瘤細(xì)胞抑制活性有所降低，而咪唑馬來酰亞胺衍生物的腫