蛋白激酶C抑制劑對(duì)人肺腺癌細(xì)胞端粒酶活性的影響.pdf_第1頁(yè)
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1、中南大學(xué)碩士學(xué)位論文蛋白激酶C抑制劑對(duì)人肺腺癌細(xì)胞端粒酶活性的影響姓名：盧忠心申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：陳正炎2002.5.1卞南土學(xué)碩士學(xué)位論文EffectofProteinKinaseCInhibitoronTelomeraseActivityinHumanLungAdenocarcinomaCellsinCultureAbstractObjectiveToprovidmeasierquickerhall

2、TlleSsandreliablemethodtoquanfitatetelomeraseactivityanonradioactivepolymerasechainreactionbasedenzymeimmunoassay(PCREIA)methodwasestablishedToinvestigateeffectofproteinkinaseC(PKC)inhibitorBisindolylmaleimideontelomeras

3、eactivityinhumanlungadenocarcinomacelllineA519，andtoprovideatheoreticalbasisforstodyingthemoleoularmechanismsintheregulationoftelomeraseactivityinvivoMethodsPCREIAmethodwasestablishedTSprimerwasbiotinylated(TSB)，andCXpri

4、merWasdigoxigeninated(CXD)TheamplicationscontainingTS_Bwerecombinedwithmicrotiterplatecoatedsweptavidin，thencombinedwithantidigoxigeninaifibodylabeledwithPODandfinallyreactedwithtetmmethylbenzidine(TMB)subsUatesolutionHu

5、manlungadenocarcinomacelllineA549wastreatedwithdifferentconcenlrationsofBisindolylmaleimidefordifferenttimesViabilityofthetreatedcellswasdeterminedbyexaminationofcellsstainedwithO2％TrypanblueSilverstainingtelor球瓶crepotam

6、plificationprotocol(TRAP)andpolymerasechainreactionbasedenzymeimmunoassay(PCREIA)wereusedforassayingtelomeraseactivityofthetreatedceilsR鶴uIbTheresultsindicatethattelomeraseactivitymeasuredbyPCREIAmethodiscomparabletothat

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