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1、目的:采用熒光定量RT-PCR 方法,將不同級(jí)別腦膠質(zhì)瘤標(biāo)本、正常腦組織標(biāo)本中hPOT1的表達(dá)水平進(jìn)行比較,并研究其與端粒長(zhǎng)度之間的相關(guān)性。為進(jìn)一步探討膠質(zhì)瘤中端粒長(zhǎng)度的調(diào)控機(jī)制、膠質(zhì)瘤的發(fā)生機(jī)制提供理論基礎(chǔ);探討其能否作為判斷膠質(zhì)瘤生物學(xué)行為和預(yù)后的指標(biāo);為今后臨床應(yīng)用分子生物學(xué)手段或基因治療腫瘤提供資料。為更靈敏、更特異的分子腫瘤標(biāo)志物的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。采用流式細(xì)胞儀,對(duì)3‘疊氮胸苷及棉酚處理后的C6及TJ905腫瘤細(xì)胞增殖指
2、數(shù)進(jìn)行了測(cè)定,初步研究了端粒酶抑制劑對(duì)膠質(zhì)瘤的影響。 方法:采集53例腦膠質(zhì)瘤手術(shù)切除標(biāo)本,8例正常腦組織。通過(guò)熒光定量RT-PCR方法檢測(cè)標(biāo)本中hPOT1的表達(dá),使用ACTB基因作為內(nèi)參照。應(yīng)用人的端粒序列特異性探針地高辛標(biāo)記的(CCCTAA)3進(jìn)行Southem雜交檢測(cè)腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的端粒長(zhǎng)度。對(duì)C6及TJ905細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)后,以棉酚或端粒酶抑制劑3‘疊氮胸苷(AZT)進(jìn)行處理,利用流式細(xì)胞技術(shù)測(cè)定其增殖指數(shù)。 結(jié)果:
3、采用SPSS 11.0 統(tǒng)計(jì)軟件,對(duì)測(cè)得數(shù)據(jù)作對(duì)數(shù)變換后進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)并利用 LSD(Least-Significant Difference)最小顯著差法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析后發(fā)現(xiàn),腫瘤組織標(biāo)本中hPOT1的表達(dá)明顯高于正常組織。Ⅲ/Ⅵ級(jí)膠質(zhì)瘤標(biāo)本中hPOT1的表達(dá)高于Ⅰ/Ⅱ級(jí)膠質(zhì)瘤標(biāo)本中hPOT1的表達(dá),二者之間有顯著性差異(P<0.05)。Ⅲ/Ⅳ級(jí)之間以及Ⅰ/Ⅱ級(jí)之間沒(méi)有明顯的相關(guān)關(guān)系。隨著端粒長(zhǎng)度的縮短hPOT1的表達(dá)水平升高 (r=
4、-0.963,P<0.05)。經(jīng)3‘疊氮胸苷(AZT)或棉酚處理后,C6及TJ905的增殖指數(shù)均大為降低,同時(shí)發(fā)現(xiàn)棉酚很可能是一種新型的端粒酶抑制劑。 結(jié)論:POTl表達(dá)水平升高在不同級(jí)別的膠質(zhì)瘤中均有體現(xiàn),其升高程度在不同級(jí)別膠質(zhì)瘤中是不同的,反映了腫瘤的增殖潛能不同。POT1表達(dá)水平與端粒長(zhǎng)度之間有明顯的相關(guān)關(guān)系,在一定程度上證明hPOT1在調(diào)節(jié)端粒長(zhǎng)度以及端粒功能的維持方面可能起著重要作用。端粒酶抑制劑有可能作為新的化療藥
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