電針足三里對(duì)腸缺血再灌注引起的多臟器損傷的保護(hù)作用及其多巴胺機(jī)制的研究.pdf

1、目的:研究電針足三里對(duì)腸缺血再灌注(I/R)所致腸及遠(yuǎn)隔器官損傷的保護(hù)作用，研究該保護(hù)作用是否與興奮或阻斷多巴胺及受體有關(guān)，探討電針足三里抗炎和抗休克的多巴胺機(jī)制，為電針治療缺血和炎癥性疾病提供理論基礎(chǔ)。
　　方法:取84只SD雄性大鼠(250±20g)，制備大鼠腸缺血再灌注損傷模型:夾閉腸系膜上動(dòng)脈根部30min恢復(fù)灌注1h或4h。隨機(jī)分為7組:手術(shù)對(duì)照組(S)，腸缺血再灌注組(IR)，電針足三里組(EA)，迷走神經(jīng)切斷加電針足

2、三里組(VX)，坐骨神經(jīng)切斷加電針足三里組(SSX)，多巴胺D1受體阻斷劑布他拉莫(Butaclamol)加電針足三里組(BC)和多巴胺D2受體阻斷劑螺哌隆(Spiperone hydrochloride)加電針足三里組(SP)。每組分為恢復(fù)灌注1h或4h兩個(gè)亞組，每個(gè)亞組6只。sham組僅開(kāi)腹不夾閉動(dòng)脈;IR組制備腸I/R模型，不進(jìn)行任何干預(yù)治療;EA組于腸缺血后即刻行電針雙側(cè)足三里穴30min，強(qiáng)度為2～3mA，頻率2～100Hz;

3、 VX組于腸缺血后即刻切斷腹腔迷走神經(jīng)，而后電針足三里穴;SSX組于腸缺血后即刻行坐骨神經(jīng)切斷后電針足三里穴;BC組于腸缺血前1h腹腔注射多巴胺D1受體阻斷劑布他拉莫(1μg/kg)，腸缺血后即刻電針足三里穴。SP組于腸缺血前1h腹腔注射多巴胺D2受體阻斷劑螺哌隆(1mg/kg)，腸缺血后即刻電針足三里穴。各組于再灌注1h和4h，處死動(dòng)物，測(cè)定血漿臟器功能指標(biāo)磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脫氫酶(LDH)、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)

4、、肌酐(Cr)和二胺氧化酶(DAO)，采用酶聯(lián)免疫吸附法(Elisa)檢測(cè)血漿多巴胺(DA)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平。檢測(cè)取心、肺、腸組織丙二醛(MDA)、髓過(guò)氧化物酶(MPO)水平，并取心、肺、遠(yuǎn)端回腸組織，病理切片蘇木素-伊紅染色，觀察心、肺、腸組織的病理形態(tài)學(xué)變化。
　　結(jié)果:1.與S組相比，IR組1h和4h血漿DA水平顯著下降。與IR組相比，電針足三里穴能顯著提高腸缺血再灌注后血漿DA水平，抑制血漿TNF-α水

5、平(各P＜0.05);切斷腹腔迷走神經(jīng)或坐骨神經(jīng)或腹腔注射butaclamol后電針足三里的上述作用消失;2.與IR組相比，電針足三里穴顯著抑制腸缺血再灌注后心臟、肺臟和腸道的MPO、MDA活性，且再灌注4h比1h作用更明顯。I/R損傷1h時(shí)電針抑制心臟、肺臟和腸道的MDA活性的百分比分別是9％，18％，8.9％，4h時(shí)電針抑制MDA活性分別是是30％，30％，39.2％; I/R損傷1h時(shí)電針抑制心臟、肺臟和腸道的MPO活性的百分比分

6、別是13.4％，41.5％，27％;4h時(shí)抑制MPO活性分別是15.1％，26.1％，37％。上述結(jié)果表明電針能有效抑制MDA、MPO活性，且在腸缺血再灌注早期實(shí)施電針治療會(huì)對(duì)組織有明顯的保護(hù)作用。3.與IR組相比，電針足三里穴能顯著降低血漿DAO活性(EA1組:33.76ng/mL±6.37ng/mL，IR組:45.47ng/mL±9.46ng/mL;EA4組:42.46ng/mL±9.21ng/mL，IR4組:65.53ng/mL±

7、10.72ng/mL;各P＜0.05)，說(shuō)明電針對(duì)大鼠的腸組織具有保護(hù)作用。4.再灌注4h，IR組動(dòng)物血漿ALT, CK-MB，LDH水平顯著升高，EA組的上述指標(biāo)水平均低于IR組(各P＜0.05)，而VX，SSX和BC組與IR組相比各指標(biāo)無(wú)顯著性差異。SP組與IR有顯著差異，表明電針保護(hù)臟器功能是通過(guò)多巴胺D1受體，而非D2受體起作用的。電針足三里對(duì)血漿Cr水平影響不明顯。5.腸缺血再灌注4h，IR組心、肺、腸的病理切片可見(jiàn)水腫、出血

8、，有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，組織紊亂。與IR組相比，電針足三里穴可減輕腸缺血再灌注后臟器的病理?yè)p傷;VX，SSX，BC組則降低電針足三里的該作用，SP組與EA組病理無(wú)明顯差別。
　　結(jié)論:電針能顯著減輕大鼠腸缺血/再灌注后心、肺、腸組織損傷，其保護(hù)機(jī)制可能與電針升高血漿多巴胺水平，降低TNF-α、MPO和MDA水平，清除氧自由基，減輕炎癥反應(yīng)有關(guān)。而切斷腹腔迷走神經(jīng)或坐骨神經(jīng)后電針足三里的上述作用減弱或消失，提示電針足三里穴能通過(guò)興奮坐骨神