電針預(yù)處理對大鼠腎臟缺血再灌注損傷的保護(hù)作用和機(jī)制.pdf

1、電針預(yù)處理是近年來提出的減輕靶器官缺血再灌注損傷的一種新方法，是指基于傳統(tǒng)針灸學(xué)的理論，在針上通以接近人體生物電的微量脈沖電流，在相應(yīng)穴位進(jìn)行針與電的雙重刺激，以達(dá)到防治疾病的一種療法。目前的研究業(yè)已證實，在心臟、脊髓、腦等器官中，電針預(yù)處理具有誘導(dǎo)其缺血耐受的效應(yīng)，但是在腎臟中，電針預(yù)處理是否具有類似的保護(hù)作用，目前尚未見相關(guān)報道。故本實驗選取與腎臟泌尿系統(tǒng)功能關(guān)系最為密切的腎俞穴，運(yùn)用電針重復(fù)刺激后建立大鼠腎臟缺血再灌注損傷模型，分

2、別從腎功能、細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡和凋亡相關(guān)調(diào)控基因的角度，研究重復(fù)電針預(yù)處理對腎臟缺血再灌注損傷的保護(hù)作用和相關(guān)分子機(jī)制。
　　 目的：研究電針預(yù)處理對腎臟缺血再灌注的保護(hù)作用以及對腎小管上皮細(xì)胞凋亡的影響，探討電針預(yù)處理減少腎小管上皮細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制。
　　 方法：健康成年雄性SD大鼠50只，體重260～320g，采用隨機(jī)數(shù)字表法，將大鼠隨機(jī)分為4組:假手術(shù)組（S組），腎臟缺血再灌注損傷組（I/R組）、戊巴比妥鈉+I/

3、R組（PB+I/R組）和針刺腎俞穴預(yù)處理+I/R組（EA+I/R組）。S組僅游離雙側(cè)腎蒂45 min后關(guān)腹;I/R組建立模型，無創(chuàng)血管夾鉗夾雙側(cè)腎蒂45 min;PB+I/R組每天腹腔注射戊巴比妥鈉30 mg/kg，連續(xù)注射5d，最后1次處理24h后開始制備模型;EA+I/R組每天采用戊巴比妥鈉麻醉后電針刺激腎俞穴30min，連續(xù)5d，最后1次處理24 h后開始制備模型。建模后1d、3d和7d時留取靜脈血標(biāo)本和腎臟組織，測定血清尿素氮（

4、BUN）和血清肌酐(Scr)濃度，進(jìn)行腎臟組織學(xué)評分（HSK評分）。并通過免疫組織化學(xué)和Western印跡等研究方法，對各組腎組織中的細(xì)胞凋亡相關(guān)分子(Bcl-2、Bax、Fas、Fasl、)及腎小管上皮細(xì)胞增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)的表達(dá)進(jìn)行檢測，初步探討重復(fù)電針預(yù)處理減輕腎臟缺血再灌注損傷的分子機(jī)制。
　　 結(jié)果：血清指標(biāo)學(xué)顯示，I/R組和PB+I/R組的各項指標(biāo)之間比較均無明顯差異。與PB+I/R組相比較，建模后第3d和7

5、d，EA+I/R組的BUN、Scr明顯降低(P＜0.05)。建模后第7d，EA+I/R組的BUN、Scr降至S組水平，而PB+I/R組則高于S組水平（P＜0.05）。通過光鏡和電鏡等形態(tài)學(xué)觀察，I/R組和PB+I/R組大鼠腎組織中可見間質(zhì)水腫，殘存的腎小管上皮細(xì)胞刷狀緣消失，大量上皮細(xì)胞脫落、壞死，電鏡下可見線粒體消失、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)減少、染色質(zhì)變性等。EA+I/R組大鼠腎組織中間質(zhì)輕度水腫，部分腎小管上皮細(xì)胞刷狀緣脫落，可見少量管型，電鏡下可

6、見細(xì)胞器相對擴(kuò)張，核染色質(zhì)邊聚等，腎小管損傷程度在建模后第3天明顯低于前兩組。免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示，建模后第3d，與I瓜組和PB+I/R組比較，EA+I/R組的腎小管上皮細(xì)胞AI、Bax、Fas和FasL表達(dá)水平降低，腎小管上皮細(xì)胞PCNA和Bcl-2表達(dá)水平升高(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：在急性腎臟缺血后，采用重復(fù)電針預(yù)處理刺激腎俞穴方式，可以降低腎臟缺血再灌注損傷大鼠的血尿素氮和血肌酐，對缺血再灌注損傷大鼠的腎功能具