桂枝不同萃取部位抗過敏作用的篩選及其作用機(jī)制研究.pdf

1、目的：針對解表藥桂枝“發(fā)汗解肌”的功能主治，及其抗過敏作用的研究現(xiàn)狀，本研究主要采用有機(jī)溶劑萃取方法制備桂枝不同萃取部位，采用體內(nèi)與體外實(shí)驗(yàn)相結(jié)合研究方式，探討桂枝抗過敏作用的有效物質(zhì)部位，并從Th1/Th2失衡、肥大細(xì)胞脫顆粒及IgE釋放角度闡釋其作用機(jī)制，以期為桂枝作為“發(fā)散風(fēng)寒”中藥用于治療過敏性疾病的應(yīng)用提供現(xiàn)代藥理學(xué)依據(jù)。
　　方法：①采用DNCB誘發(fā)的小鼠遲發(fā)型超敏反應(yīng)模型及小鼠異種被動(dòng)皮膚過敏反應(yīng)模型，觀察桂枝不同萃

2、取部位對模型動(dòng)物毛細(xì)血管通透性、耳腫脹度的影響，結(jié)合體外透明質(zhì)酸酶抑制實(shí)驗(yàn)，以初步篩選桂枝抗過敏作用的有效萃取部位。②采用組胺、5-羥色胺所致小鼠皮膚毛細(xì)血管通透性增高模型和卵白蛋白所致豚鼠支氣管哮喘模型，進(jìn)一步明確桂枝去油水煎液、乙酸乙酯萃取部位的抗過敏效應(yīng)。③測定支氣管哮喘模型豚鼠血清IFN-γ、IL-4、IgE的含量，及肺泡灌洗液中IFN-γ、IL-4、IL-18、總蛋白水平，并觀察含藥血清體外對大鼠腹腔肥大細(xì)胞β-氨基己糖苷酶與

3、組胺釋放率的影響，探討桂枝抗過敏作用有效部位的作用機(jī)制。④通過理化反應(yīng)初步探討桂枝抗過敏作用有效萃取部位的大類物質(zhì)成分。
　　結(jié)果：①桂枝去油水煎液6g/kg、桂枝乙酸乙酯萃取部位6g/kg、水提部位6g/kg連續(xù)給藥10d，能顯著降低遲發(fā)型過敏反應(yīng)模型小鼠的毛細(xì)血管通透性（P<0.01或P<0.05），乙酸乙酯萃取部位亦能明顯抑制該模型小鼠的耳廓腫脹度（P<0.05）；三者灌胃給藥7d，對小鼠異種被動(dòng)皮膚過敏反應(yīng)的血管通透性有明

4、顯抑制作用（P<0.05或P<0.01）。桂枝去油水煎液與桂枝乙酸乙酯萃取部位體外對透明質(zhì)酸酶有較強(qiáng)的抑制作用，抑制率分別為52.48％、52.17%。②桂枝去油水煎液6g/kg、桂枝乙酸乙酯萃取部位6g/kg灌胃給藥7d，對組胺、5-HT所致小鼠毛細(xì)血管通透性的增加有顯著抑制作用（P<0.01，P<0.05）；桂枝乙酸乙酯萃取部位1.665、3.33g/kg及桂枝去油水煎液1.665g/kg灌胃給藥7d，顯著降低支氣管哮喘模型豚鼠全血

5、白細(xì)胞計(jì)數(shù)，減輕豚鼠肺組織中嗜酸性粒細(xì)胞浸潤，并對肺組織中支氣管管腔內(nèi)細(xì)胞碎片、上皮細(xì)胞脫落及炎細(xì)胞浸潤表現(xiàn)出不同程度的減輕趨勢，亦能降低模型動(dòng)物肺泡灌洗液中總蛋白含量。③桂枝乙酸乙酯萃取部位1.665、3.33g/kg及桂枝去油水煎液1.665g/kg灌胃給藥7d，能不同程度地升高支氣管哮喘模型豚鼠肺泡灌洗液與血清中IFN-γ水平，降低IL-4含量，并能升高肺泡灌洗液中IL-18含量（P<0.01），降低血清IgE含量（P<0.01）

6、。桂枝乙酸乙酯萃取部位含藥血清、桂枝去油水煎液含藥血清體外均能不同程度地抑制大鼠腹腔肥大細(xì)胞β-氨基己糖苷酶、組胺的釋放，顯示出抑制肥大細(xì)胞脫顆粒作用。
　　結(jié)論：桂枝抗過敏作用的有效萃取部位是桂枝乙酸乙酯萃取部位、桂枝去油水煎液，提示水溶性成分起主導(dǎo)作用。其抗過敏作用的發(fā)揮是多途徑的，與其抑制IL-4細(xì)胞因子釋放，促進(jìn)IFN-γ、IL-18細(xì)胞因子釋放，從而糾正失衡的Th1/Th2細(xì)胞亞群，抑制肥大細(xì)胞脫顆粒過程而減少過敏介質(zhì)的