荊防散抗過敏有效部位的篩選及其抗過敏作用機制研究.pdf

1、目的：基于荊芥、防風抗過敏作用的研究成果，提取分離有效部位，利用小鼠PCA等實驗模型，探討荊防散抗過敏作用的有效提取部位，并深入研究其作用機制，為進一步闡釋荊芥、防風配伍使用治療“風邪”所致疾病的現(xiàn)代科學內(nèi)涵提供藥理學依據(jù)。
　　方法：（1）荊防散各極性提取部位的制備與有效部位篩選：①系統(tǒng)溶劑法將荊防散水煎液依次萃取獲得石油醚部位，乙酸乙酯部位，正丁醇部位以及水提部位。②采用DNCB誘發(fā)小鼠遲發(fā)型超敏反應實驗，篩選荊防散抗過敏作用

2、的有效提取部位，并進一步采用組胺、5-HT致小鼠毛細血管通透性增加實驗、右旋糖酐致小鼠瘙癢實驗及小鼠同種、異種被動皮膚過敏反應實驗，驗證該部位的抗過敏作用。（2）荊防散抗過敏有效提取部位作用機制研究：①ELISA法測定主動全身過敏反應模型小鼠血清IgE、LTB4水平及肺組織NO、iNOS、LTB4水平；②紫外分光光度法測定模型小鼠肺組織PGE2水平；③qRT-PCR法測定荊防散有效提取部位對主動全身過敏反應模型大鼠肺組織IL-4、IFN

3、-γmRNA表達量的影響；④ELISA法測定主動全身過敏反應模型大鼠血清IL-4、IFN-γ水平。
　　結(jié)果：（1）荊防散揮發(fā)油、含油水煎液和乙酸乙酯部位能顯著抑制DNCB誘發(fā)的遲發(fā)型超敏反應模型小鼠抗原攻擊所致的耳廓腫脹（P<0.05）及耳廓血管通透性增高，其余藥物組作用不明顯。（2）荊防散乙酸乙酯提取物6.67g/kg、10.01g/kg連續(xù)灌胃給藥9天，顯著降低DNCB誘發(fā)的小鼠遲發(fā)型超敏反應所致的耳腫脹，并降低胸腺、脾臟指

4、數(shù)（P<0.05，P<0.01）；明顯抑制組胺或5-HT所致的小鼠皮膚毛細血管通透性增高（P<0.05）。荊防散乙酸乙酯提取物10.01g/kg連續(xù)灌胃給藥7天，明顯縮短右旋糖酐所致的小鼠瘙癢反應持續(xù)時間（P<0.05）；6.67g/kg、10.01g/kg連續(xù)灌胃給藥6天，顯著降低小鼠同種、異種被動皮膚過敏反應中小鼠腹部皮膚毛細血管通透性的增高（P<0.05，P<0.01）。（3）荊防散乙酸乙酯提取物6.67g/kg顯著降低卵白蛋白致

5、敏小鼠的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)（P<0.05），顯著降低血清IgE、LTB4水平（P<0.05），并明顯降低肺組織NO、LTB4及PGE2水平（P<0.05）。乙酸乙酯提取物10.01g/kg、6.67g/kg均能明顯降低肺組織iNOS水平（P<0.05）。（4）荊防散乙酸乙酯提取物2.5g/kg、5g/kg顯著下調(diào)全身主動過敏反應模型大鼠肺組織IL-4mRNA的表達，同時降低血清IL-4水平，能上調(diào)模型大鼠肺組織IFN-γmRNA的表達，

6、并升高血清IFN-γ水平，以糾正失衡的Th1/Th2細胞亞群功能。
　　結(jié)論：乙酸乙酯提取部位是荊防散抗過敏作用的有效提取部位?？惯^敏作用機制與減少IgE的生成，抑制炎性過敏介質(zhì)NO、LTB4及PGE2的釋放，即與干預花生四烯酸代謝通路及NO/iNOS代謝通路有關(guān)。此外，藥物能通過下調(diào)致敏動物肺組織IL-4 mRNA表達，升高IFN-γmRNA表達，降低致敏動物血清IL-4水平，升高血清IFN-γ水平，糾正失衡的Th1/Th2細胞