變應性鼻炎患者IL-35對于Treg-Th17細胞平衡的調控作用.pdf

1、目的:變應性鼻炎(AR)發(fā)病機制復雜，眾多細胞及細胞因子參與其發(fā)病過程，很多學者認為與Th1/Th2細胞失衡機制有關，但該學說仍有其不足的方面。近年研究發(fā)現(xiàn)調節(jié)性T細胞(Treg)、輔助性T細胞17(Th17)及相關細胞因子IL-17與AR的發(fā)生密切相關，Treg/Th17細胞失衡學說日益受到重視，這可能是對Th1/Th2學說的重要補充，對于AR發(fā)病機制的研究有著重要意義。且隨著IL-35的發(fā)現(xiàn)及研究的深入，學者們逐漸認識到IL-35在

2、免疫應答中發(fā)揮的重要作用。IL-35作為一種抑制性細胞因子，它可以對多個T細胞亞群的分化及功能產生影響，可能對維持Treg/Th17細胞平衡有著重要意義。已有研究證明IL-35數(shù)量及功能的缺失參與了多種疾病的發(fā)生發(fā)展。然而目前IL-35在AR中的研究仍相對不足，我們擬通過本實驗檢測AR患者外周血中IL-35，IL-17，Treg的表達水平，研究IL-35、IL-17及Treg在AR發(fā)病機制中的作用，探討IL-35對于Treg/Th17細

3、胞平衡的調控作用及其在AR免疫治療中可能存在的價值。
　　方法:本實驗隨機選取了就診于河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院耳鼻喉科門診并確診為變應性鼻炎的患者30例為AR組，于我院體檢科檢查的健康體檢者20例為對照組，分別符合各組入組標準。采集受試者外周靜脈血4ml，按要求離心，取上層血清分裝兩管，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)雙抗體夾心法對外周血中IL-35及IL-17的表達水平進行檢測，根據(jù)實驗所測OD值從而計算出樣本待測指標濃度值。同期

4、采集受試者外周血2ml，采用流式細胞術對CD4+CD25+Foxp3+T細胞表達水平進行檢測，結果以CD4+CD25+Foxp3+T細胞占CD4+T細胞的百分率表示。所有實驗數(shù)據(jù)均采用SPSS19.0軟件進行統(tǒng)計學分析處理，本實驗所有數(shù)據(jù)均屬于計量資料，數(shù)據(jù)經正態(tài)性檢驗符合正態(tài)分布，AR組與對照組相比較，采用兩個獨立樣本的T檢驗，相關性分析采用Pearson相關檢驗，所有統(tǒng)計均采用雙側概率檢驗，α=0.05，以p＜0.05為差異有統(tǒng)計學

5、意義。
　　結果:1AR組與對照組血清IL-35的表達水平相比較，AR組中IL-35的表達水平為54.127±8.138 pg/mL，對照組中IL-35的表達水平為71.622±6.227 pg/mL，AR組IL-35的表達水平顯著低于對照組，(t=-8.145，p＜0.01)，差異有統(tǒng)計學意義。
　　2 AR組與對照組血清IL-17的表達水平相比較，AR組中IL-17的表達水平為422.267±55.140 pg/mL，對

6、照組中IL-17的表達水平為261.103±17.070 pg/mL，AR組IL-17的表達水平顯著高于對照組，(t=14.969，p＜0.01)，差異有統(tǒng)計學意義。
　　3 AR組患者血清中IL-35與IL-17表達水平呈明顯的負相關關系，(r=-0.773，p＜0.01)。
　　4 AR組中CD4+CD25+Foxp3+ Treg細胞占CD4+T細胞的百分率為3.917±0.820，對照組中CD4+CD25+Foxp3+

7、 Treg細胞占CD4+T細胞的百分率為6.861±0.616，AR組CD4+CD25+Foxp3+Treg細胞占CD4+T細胞的百分率明顯低于對照組，（t=-13.678，p＜0.01）。說明AR組與對照組中CD4+CD25+Foxp3+ Treg細胞表達水平存在差異，且差異有統(tǒng)計學意義。
　　5 AR組外周血中CD4+CD25+Foxp3+Treg細胞占CD4+T細胞的百分率，與外周血中IL-35的表達水平進行相關性分析，結果

8、示二者間存在正相關關系，(r=0.736，p＜0.01)。
　　6 AR組外周血中CD4+CD25+Foxp3+Treg細胞表達水平占CD4+T細胞的百分率，與外周血中IL-17的表達水平進行相關性分析，結果示二者間存在負相關關系，(r=-0.630，p＜0.01)。
　　結論:1 AR患者外周血中IL-35的表達水平顯著低于對照組，而IL-17的表達水平顯著高于對照組，提示IL-35分泌減少、IL-17分泌增加與AR的發(fā)病

9、有關。
　　2 AR患者外周血中IL-35與IL-17的表達水平呈明顯的負相關關系，IL-35是免疫應答中重要的抑制性細胞因子，AR的發(fā)生可能與IL-35介導的免疫抑制作用減弱進而導致Th17細胞功能亢進及IL-17分泌增加有關。
　　3 AR患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+ Treg細胞占CD4+T細胞的百分率低于健康對照組，提示AR中Treg細胞的分化及功能可能受到抑制，這可能是AR發(fā)生的重要機制。
　　

10、4 AR患者外周血中IL-35的表達水平與CD4+CD25+Foxp3+ Treg細胞占CD4+T細胞的百分率之間存在正相關關系，即在AR患者外周血中IL-35與CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg細胞的表達均降低，提示，可能是由于 AR中IL-35數(shù)量的減少，使其促進Treg細胞增殖的能力減弱，導致Treg細胞的數(shù)量減少及抑制作用減弱;也可能由于IL-35是Treg細胞發(fā)揮免疫抑制作用的關鍵性細胞因子，AR中Treg細胞因為缺

11、乏IL-35，阻礙了Treg細胞免疫抑制作用的發(fā)揮。二者存在相互作用參與AR的發(fā)生。
　　5 AR患者外周血中IL-17的表達水平與CD4+CD25+Foxp3+ Treg細胞占CD4+T細胞的百分率之間存在負相關關系，IL-17主要由Th17細胞分泌產生的細胞因子，IL-17的分泌增加，間接提示在AR患者外周血中可能存在著Th17細胞功能的亢進，存在Treg/Th17細胞失衡機制。
　　6本實驗間接說明了，IL-35是影響