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文檔簡介
1、本文主要從以下幾個部分展開論述:
第一部分正常實(shí)驗(yàn)兔肝臟體素內(nèi)不相干運(yùn)動-磁共振擴(kuò)散加權(quán)成像與CT灌注成像的可行性及相關(guān)性探討
目的:
通過對正常實(shí)驗(yàn)兔肝臟進(jìn)行體素內(nèi)不相干運(yùn)動-磁共振擴(kuò)散加權(quán)成像與CT灌注成像,優(yōu)化掃描參數(shù),探討其可行性、可重復(fù)性及兩種掃描方法所得參數(shù)的相關(guān)性。探索多b值IVIM DW-MRI反映微血管灌注特征的參數(shù)假擴(kuò)散D*、灌注分?jǐn)?shù)f與CT灌注BV、BF等參數(shù)之間的相關(guān)性,驗(yàn)證多b值I
2、VIMDW-MRI評價(jià)組織擴(kuò)散和微血管灌注的可能性及準(zhǔn)確性。
方法:
1.實(shí)驗(yàn)對象:
健康新西蘭大白兔8只,體重2.3~2.7Kg。動物由廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供。
2.主要設(shè)備及試劑:
飛利浦Achieva3.0 T磁共振掃描儀、上海辰光3.0T相控陣兔子射頻線圈、西門子Definition AS+多層螺旋CT、速眠新Ⅱ注射液,3%戊巴比妥鈉溶液、碘海醇300mgl/ml。
3、 3.實(shí)驗(yàn)方法:
3.1 磁共振掃描
磁共振掃描序列包含橫斷面T2WI序列及IVIM DWI序列。
3.2 CT灌注成像
3.3 IVIM圖像處理及參數(shù)生成.
3.4 CT灌注圖像處理及參數(shù)生成.
結(jié)果:
1.正常實(shí)驗(yàn)兔肝臟CTP參數(shù)的可重復(fù)性
ALP的可重復(fù)性較差,ICC及CV分別為0.7940和35.44%。
2.正常實(shí)驗(yàn)兔肝臟IVIM參數(shù)的可
4、重復(fù)性
D的可重復(fù)性最好,ICC及CV分別為0.9368和6.86%;D*和f的可重復(fù)性也是良好,ICC及CV分別為0.8623和12.25%,0.8789和11.19%。
3.正常實(shí)驗(yàn)兔肝臟CTP參數(shù)IVIM參數(shù)的相關(guān)性
分別對實(shí)驗(yàn)兔肝臟CTP參數(shù)BF和IVIM參數(shù)D*,BV和f行Pearson相關(guān)性分析,可得到相關(guān)系數(shù)分別為0.155和0.018,相伴概率分別為0.222和0.886,兩組參數(shù)之間均無明
5、顯的相關(guān)性。
結(jié)論:
正常實(shí)驗(yàn)兔肝臟的CTP和IVIM參數(shù)中,BF和D*、BV和f值之間沒有明確的相關(guān)性。
第二部分非酒精性脂肪肝病動物模型的建立
目的:
通過對實(shí)驗(yàn)兔采用高脂高膽固醇飲食(high fat diet,HFD),復(fù)制與人類非酒精性脂肪肝病的病理生理學(xué)特點(diǎn)接近,且適合影像學(xué)研究的動物模型。通過比較不同的時(shí)間點(diǎn)及不同病變程度的模型,觀察非酒精性脂肪肝病的疾病演變情況。
6、 材料與方法:
1.實(shí)驗(yàn)對象:
健康雄性新西蘭大白兔49只,6-8月齡,體重2.2~2.5Kg。動物由廣州中醫(yī)藥大學(xué)動物實(shí)驗(yàn)中心提供。
2.主要設(shè)備及試劑:美國Beckman Coulter公司AU5800全自動生化分析儀、日本Sony公司NEX-5R微單相機(jī)、日本Olympus公司Olympus BX-53型光學(xué)顯微鏡、日本電子株式會社JEM1400型透射電鏡、高脂高膽固醇飼料。
3.實(shí)驗(yàn)方法
7、:
3.1 造模方法.
2.3.2 一般情況監(jiān)測
觀察實(shí)驗(yàn)兔的一般情況,包括體重,飲食,大小便,精神狀態(tài)及日?;顒忧闆r。
2.3.3 生化檢測.
2.3.4 病理學(xué)檢查.
結(jié)果:
1.HFD-12W和HFD-16W組實(shí)驗(yàn)兔在12周左右開始反復(fù)出現(xiàn)食欲減退及厭食,活動減少,部分合并腹瀉,體重變化不明顯。
2. NAS評分系統(tǒng)分組
根據(jù)NAS評分系統(tǒng),
8、正常組為9只,NAFL為0只,可疑NASH(Borderline組,NAS為3-4分)13只,NASH組(NAS>4分)19只。
3.生化檢測結(jié)果
正常對照組與各高脂高膽固醇飲食組的ALT、AST、TB組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
4.大體病理觀察
正常對照組、Borderline組及NASH組的肝臟最大徑線及肝體指數(shù)各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均為0.000),正常對照組與Borderline組及NA
9、SH組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05),Borderline組及NASH組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。
5.組織病理學(xué)觀察
本組肝纖維化較少,其中F1組5只,Masson染色表現(xiàn)為以肝小葉中央靜脈為中心的竇周纖維化,銀染表現(xiàn)為中央靜脈周圍及竇周隙見纖細(xì)的網(wǎng)狀纖維分布,增多、變直的網(wǎng)站纖維插入肝細(xì)胞間或細(xì)胞間隙,包繞肝細(xì)胞;F2組3只,Masson染色表現(xiàn)為纖維化擴(kuò)展到匯管區(qū),可見局灶性星芒狀纖維化,銀
10、染顯示匯管區(qū)膠原纖維增多,匯管區(qū)周圍見膠原纖維放射狀伸入肝小葉內(nèi)。
3.6 透射電鏡觀察
區(qū)域性毛細(xì)膽管增生、擴(kuò)張。部分肝細(xì)胞間及Disse間隙可見束狀膠原纖維沉積。
結(jié)論:
本研究成功復(fù)制了接近臨床NAFLD病理改變的新西蘭大白兔的非酒精性脂肪肝病模型。
第三部分非酒精性脂肪肝病動物模型體素內(nèi)不相干運(yùn)動-擴(kuò)散加權(quán)成像及CT灌注成像與病理的對照研究
目的:
通過IVI
11、M及CTP結(jié)果與NAFLD病理半定量分析結(jié)果進(jìn)行對照分析,探索IVIM及CTP定量參數(shù)診斷NAFLD的可行性,評價(jià)IVIM在診斷NAFLD中的診斷效能及優(yōu)劣,探索出IVIM、CTP定量參數(shù)與NAFLD嚴(yán)重程度之間的相關(guān)性。
材料與方法:
1.實(shí)驗(yàn)對象:
同第二部分。
2.主要設(shè)備及試劑:
同第一、二部分。
3.實(shí)驗(yàn)方法:
3.1 IVIM掃描及相應(yīng)參數(shù)生成
12、見第一部分,參數(shù)結(jié)果取四個肝葉的平均值。
3.2 CT掃描及相應(yīng)參數(shù)生成.
結(jié)果:
1.正常實(shí)驗(yàn)兔及NAFLD肝臟的CT平掃表現(xiàn)
各組間均差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,NASH組<Borderline組<正常對照組(P均<0.05)。
2.實(shí)驗(yàn)兔CTP的表現(xiàn)及參數(shù)比較
CT灌注成像顯示正常對照組的實(shí)驗(yàn)兔肝實(shí)質(zhì)時(shí)間密度曲線(time densitycurve,TDC)呈速升平臺型,高脂飲食組
13、肝實(shí)質(zhì)TDC呈緩升平臺型,正常對照組脾臟TDC呈速升緩降型,高脂飲食組TDC呈緩升平臺型。
3.實(shí)驗(yàn)兔肝臟磁共振平掃的表現(xiàn)及IVIM、ADC參數(shù)比較
NAFLD模型組實(shí)驗(yàn)兔的肝臟較正常組實(shí)驗(yàn)兔增大,正常實(shí)驗(yàn)兔肝臟IVIM-DWI表現(xiàn)為隨b值增加,肝臟信號增加,ADC圖呈中等信號,信號衰減曲線呈典型的雙指數(shù)改變,低b值部分斜率陡峭,NAFLD模型組實(shí)驗(yàn)兔的肝臟IVIM-DWI上表現(xiàn)為隨b值增加,肝臟信號增加更明顯,AD
14、C呈較低信號,信號衰減曲線接近單指數(shù)改變,低b值部分斜率變小。
4. CTP、IVIM及ADC參數(shù)診斷效能的比較
D值的診斷效能最佳,曲線下面積(area under curve,AUC)為1.0,其后依次為f、 PVP、HPI、D*、BF、ADC和BV。在鑒別Borderline與NASH中,僅D、D*和ADC差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值分別為0.0257,0.0322,0.0018),曲線下面積分別為0.723,0.7
15、04和0.767,其它參數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。
5. CTP、IVIM參數(shù)與NAS評分的相關(guān)及回歸分析
BF、BV及ALP與NAS評分之間的相關(guān)系數(shù)分別為-0.287,-0.186,0.132,相伴概率P均大于0.05,提示不存在顯著相關(guān)性。PVP和NAS的相關(guān)系數(shù)為-0.588,相伴概率為0.000,提示PVP與NAS呈顯著的負(fù)相關(guān),HPI和NAS的相關(guān)系數(shù)為0.594,相伴概率為0.000,提示H
16、PI與NAS呈顯著的正相關(guān)。IVIM參數(shù)中,D,D*,f及ADC與NAS的相關(guān)系數(shù)分別為-0.627,-0.556,-0.623和-0.519,相伴概率為0.000,提示均與NAS呈顯著的負(fù)相關(guān)。
為了進(jìn)一步明確相關(guān)的CTP及IVIM參數(shù)與NAS之間有無線性關(guān)系,采用逐步選擇法進(jìn)行多元線性回歸分析。結(jié)果僅D和f選入回歸方程,回歸方程為Y=12.730-0.7667X1-0.101 X2(Y為NAS評分,X1為D,X2為f),R
17、2=0.716,NAS評分與D及f存在線性回歸關(guān)系。
結(jié)論:
非酒精性脂肪肝病的D,D*和f值均較正常組下降,說明肝組織的分子擴(kuò)散及微循環(huán)灌注均出現(xiàn)障礙。CTP中的BF、BV也出現(xiàn)下降,門脈灌注量PVP明顯下降,同時(shí)出現(xiàn)HPI增高,提示NAFLD微循環(huán)灌注下降后,可出現(xiàn)類似于肝硬化的肝動脈緩沖效應(yīng)。
非酒精性脂肪肝病的診斷中,雙指數(shù)模型IVIM參數(shù)的診斷效能均優(yōu)于單指數(shù)模型參數(shù)ADC,CTP參數(shù)PVP和HP
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