塞隆骨化學(xué)成分的分離純化與生物活性初步研究.pdf

1、本文以塞隆骨為研究對(duì)象，運(yùn)用制備型高效液相色譜法和二維液相色譜法，分別從提取工藝方法的選擇、不同模式的二維正交液相色譜方法的建立、主要單體化合物的純化制備和組分化合物的活性初篩四個(gè)方面展開(kāi)研究，為新藥開(kāi)發(fā)奠定了一定的物質(zhì)基礎(chǔ)。
　　通過(guò)考察影響塞隆骨提取效果的因素，如提取方式、提取溶劑、提取時(shí)間、提取次數(shù)和料液比，對(duì)塞隆骨提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，得到了最佳提取工藝；醇提物一維分離制備采用正相DAISO Silica柱，水提物采用反相DA

2、ISO C18柱，分別考察不同洗脫程序?qū)Ψ蛛x過(guò)程的影響，最終確定了最佳制備方法工藝，正相制備色譜得到10個(gè)組分，反相得到5個(gè)組分，對(duì)樣品進(jìn)行了初步砍斷分割，為后續(xù)二維分離制備提高了效率。
　　二維建立了DAISO Silica柱和YMC Diol柱聯(lián)用的新型2D-NPLC/HILIC制備色譜分離體系以及雙硅膠柱聯(lián)用（2D-NPLC/NPLC）的分離體系，具有良好選擇性和正交性，實(shí)現(xiàn)了塞隆骨醇提物組分中小極性難分離物質(zhì)和中等極性物質(zhì)

3、的一個(gè)高效分離制備，得到16個(gè)高純度化合物，部分純度達(dá)到98％以上，結(jié)合質(zhì)譜和核磁數(shù)據(jù)對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征，表明醇提組分主要物質(zhì)為甾醇和有機(jī)酸類(lèi)物質(zhì)。
　　對(duì)水提物運(yùn)用建立的2D-RPLC/RPLC色譜體系，選擇親水高密度鍵合極性MP C18柱，對(duì)復(fù)雜水提組分進(jìn)行了有效的分離，得到高純度單一化合物9種，結(jié)構(gòu)鑒定得到其序列，多為多肽，分子量為1kD左右，為塞隆骨進(jìn)一步的藥理、毒理活性研究提供新的物質(zhì)基礎(chǔ)。
　　塞隆骨提取物對(duì)前破骨