MUC2在IBD動物模型的作用機制研究.pdf

1、研究背景：
　　炎癥性腸病(IBD),發(fā)病率逐年上升，已是全球重要消化系統疾病問題,主要分為潰瘍性結腸炎（ulcerative colitis，UC）與克羅恩病（Crohn’s disease， CD）,確切病理機制不明，可能與腸道內菌群與免疫介導的粘膜屏障組織損傷等多方面因素綜合作用有關，任何單一因素破壞均可能誘發(fā)IBD，粘蛋白MUC2是組成腸道粘膜屏障的一部分,目前國內對此研究的較少。
　　目的：
　　通過觀察慢性

2、 IBD動物模型中結腸組織學變化，檢測小鼠血清及解除組織中CBir1、muc2表達水平，給與模型組不同的干預措施，探討muc2在IBD中作用機制，以便探討IBD相關發(fā)病機理。
　　方法：
　　雄性的BALb/c小鼠SPF級60只，完全隨機分4組，15只/組。①對照組：不進行干預，自由飲用水跟食物。②TNBS/50％乙醇組：在第1天用TNBS/50%乙醇2.0mg/100μl灌腸，第8天用TNBS/50%乙醇2.5mg/100

3、μl灌腸，第15天用TNBS/50%乙醇3.0mg/100μl灌腸。③酮替芬（ketotifen）+TNBS+50%乙醇組：TNBS/50%乙醇同②，應用0.5mg酮替芬(溶于100μl生理鹽水，并每次灌腸前30min小鼠的腹腔內注射100μl上述酮替芬溶液。④LPS+TNBS+OVA+50%乙醇組:LPS（10μg）與OVA（20μg）加入100μl0.9%氯化鈉溶液中，分別于4個不同時間點（7，9，12，15）腹腔注射100μl，將

4、 OVA（50μg）加入100ul0.9%氯化鈉溶液中，并分別在灌腸前腹腔注射（18,19,20,21）。然后對各組每只小鼠分別進行DAI評分，在第9天各組各處死1只行結腸組織PAS染色，在第22天處死所有小鼠，測定各組小鼠血清的 muc2、抗-CBir1濃度，并運用 HE染色所取小鼠的組織，碘酸雪夫染色（Periodic Acid-Schiff stain，PAS）進行染色后及免疫組化方法檢測小鼠IBD動物模型觀察MUC2的表達。

5、r>　　運用SPSS17.0統計軟件將實驗數據進行處理，計量數據正態(tài)性檢驗及方差齊性檢驗，符合正態(tài)分布者用均數±標準差（±S）進行統計描述，應用t檢驗或矯正的t檢驗進行統計分析；不符合正態(tài)分布者用中位數及（25分位數-75分位數）[M(P25- P75)]進行統計描述，用秩和檢驗進行統計分析。定性資料的分析應用卡方檢驗。設定α=0.05，P<0.05認為有統計學意義。
　　結果：
　　（1）正常對照組：結腸粘膜上皮細胞排列整

6、齊，未見炎性細胞侵潤，②TNBS+50%酒精組、③TNBS+TTF組、④LPS+OVA+TNBS+50%組對比正常對照組，漿細胞增多，可見淋巴細胞，淋巴濾泡增多，而LPS+OVA+TNBS+50%乙醇組正常腺體結構基本消失，炎癥程度最高，可見大量炎性細胞浸潤，甚至可累及全層。
　?。?）HI評分、DAI評分②TNBS+50%乙醇組、③TTF+TNBS+50%乙醇組、④LPS+OVA+TNBS+50%乙醇組高于正常對照組(P＜0.0

7、5)，差異有統計學意義；②TNBS組、③酮替芬組、④LPS組的碘酸雪夫染色及IHCE方法測定MUC2表達低于正常對照組(P＜0.05)，差異有統計學意義，碘酸雪夫染色及IHCE所測定 MUC2表達②TNBS組低于③酮替芬組(P＜0.05)，差異有統計學意義；③酮替芬組PAS染色及免疫組化測定的MUC2表達T低于④LPS組(P＜0.05)，差異有統計學意義；
　　結論：
　　（1）BALb/c小鼠TNBS+50%乙醇灌腸，成功