2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、現(xiàn)實環(huán)境中人們受到放射線輻射的機會非常多,從食品輻照、醫(yī)用射線到空間電離輻射,輻射無處不在。大劑量輻射可引起機體多種組織和器官的損傷,甚至誘發(fā)細胞突變、癌變、致死等嚴重后果。輻射產(chǎn)生大量自由基,導(dǎo)致機體氧化應(yīng)激是輻射損害的主要作用機理之一。吡咯喹啉醌(pyrroloquinoline quinone,PQQ)是一種氧化還原酶的輔基,作為電子的供體和受體參與氧化還原過程。大量研究表明PQQ有很強的清除自由基能力。Hari等構(gòu)建的PQQ基因

2、工程菌有較強的清除自由基能力,上調(diào)過氧化氫酶和超氧化物歧化酶活力,顯示出極強的耐輻射能力。本實驗室初步研究顯示PQQ對高能電子射線照射引起的大鼠皮膚損傷有一定的防護作用。本研究擬從抗氧化損傷角度出發(fā),研究PQQ對60Coγ射線照射細胞的輻射效應(yīng)的影響;同時建立60Coγ射線照射小鼠損傷模型,進一步探討PQQ對輻射損傷動物的防護作用。 一、PQQ(吡咯喹啉醌)對60Coγ射線照射胃癌細胞株AGS細胞抗氧化能力的影響 目的:

3、通過檢測PQQ對60Coγ射線照射AGS細胞的生長增殖,細胞抗氧化水平及自由基含量變化,研究PQQ對輻射細胞的防護作用機制。 方法:將AGS細胞培養(yǎng)在含10%胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液中,置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱,保持飽和濕度,環(huán)境溫度為25℃。取對數(shù)生長期的細胞,經(jīng)臺盼藍染色,活細胞超過80%者用于實驗。實驗分四組:正常未照射組、單純照射組、PQQ處理未照射組、PQQ處理照射組。于照射前4h加入PQQ,PQQ在培養(yǎng)液

4、中的終濃度為10μmol/L。室溫條件下,照射組細胞用60Coγ射線照射,照射劑量8Gy,劑量率1Gy/min,單次照射。各組于輻照后6h、24h、48h、72h進行MTT測定,繪制照射后各組細胞的生長曲線;分別于輻照后6h、12h、24h,收集、裂解細胞,制備細胞勻漿,檢測細胞T-AOC、SOD及MDA含量。 結(jié)果:①正常未照射組AGS細胞生長曲線呈倒“Z”狀,在24h-48h細胞呈指數(shù)增長;其余各組均出現(xiàn)細胞增殖抑制,其抑制

5、程度依次是:單純照射組

6、抗氧化水平降低,自由基含量升高,導(dǎo)致細胞的氧化應(yīng)激。PQQ一方面能直接清除自由基,調(diào)節(jié)其它抗氧化酶系的活性,保護細胞免受自由基攻擊;另一方面通過抑制受照后AGS細胞增殖,有利于遺傳物質(zhì)的損傷修復(fù)。同時PQQ也能抑制正常生長的AGS細胞的增殖。 二、PQQ(吡咯喹啉醌)對γ射線照射小鼠輻射防護作用的初步研究 目的:建立60COγ射線損傷小鼠模型,經(jīng)口灌服PQQ,檢測小鼠血清抗氧化水平及肝組織損傷程度,初步研究PQQ對γ輻射

7、小鼠的防護作用 方法:8周齡的昆明小鼠,雌雄各半。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后。小鼠隨機分未照射組和照射組,其中照射組分低劑量照射組(5Gy)和高劑量照射組(10Gy)。各照射劑量組再分成三組:照射前給藥組、照射后給藥組、照射未給藥組,每組10只。給藥組小鼠經(jīng)口灌服PQQ,口服劑量按體重計2mg/kg/d。照射前給藥組小鼠于照射前連續(xù)給藥7天。至第8天,按分組要求進行60Coγ射線單次照射。照射后給藥組小鼠于照射后連續(xù)給藥7天。于照射后第8

8、天,頸椎脫臼處死小鼠,收集血液及肝,制備血清及肝勻漿,-20℃保存,進行各項指標(biāo)測定。同時,制作肝切片,HE染色觀察其結(jié)構(gòu)。 結(jié)果:所有10Gy劑量照射組小鼠,于照射后8天全部死亡,照射前口服PQQ組平均存活7天,照射后口服PQQ組平均存活6.2天,單純照射組平均存活5.3天。5Gy劑量照射未給藥組小鼠,血清及肝臟中SOD、T-AOC顯著下降,MDA顯著升高;肝板排列紊亂,有明顯的肝細胞水腫現(xiàn)象。而照射組給藥組小鼠,血清SOD、

9、T-AOC含量顯著升高,基本達到正常未照組水平,自由基含量雖高于正常未照組,但顯著低于單純照射組;肝臟中SOD含量升高顯著。從小鼠肝組織HE染色切片看:所有照射組小鼠肝組織都有肝板排列紊亂,竇周隙縮小或消失,局部出現(xiàn)肝細胞水腫,變性、壞死現(xiàn)象,照射前及照射后給藥組肝損傷程度比照射未給藥組稍嚴重。 結(jié)論:γ輻射引發(fā)小鼠全身性的氧化應(yīng)激,肝臟是重要的輻射敏感器官。本研究顯示:PQQ對γ輻射小鼠引起的全身氧化應(yīng)激有一定的防護作用,PQ

10、Q也能在一定程度上延長高劑量輻射小鼠的存活時間。其作用機制:PQQ能直接清除自由基,同時能調(diào)動照射小鼠的全身自由基清除系統(tǒng),尤其是SOD的活性,降低自由基含量。PQQ對肝損傷的沒有明顯表現(xiàn)出來,主要原因可能是由于輻射引起的肝損傷嚴重,肝代償功能下降,PQQ的應(yīng)用反而加重了肝負擔(dān)。因此,進一步研究PQQ的處理濃度、處理方式,作用時間將有利于揭開PQQ對急性肝損傷的防護機制。 綜上所述,PQQ能通過直接清除自由基及調(diào)動其它的抗氧化機

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