魚腥草素鈉抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜增殖作用的實驗研究.pdf

1、目的：魚腥草素鈉（Sodium Houttuyfonate，SH）抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（Rheumatoid Arthritis，RA）滑膜增殖作用的實驗研究及探討其可能的作用機制。
　　方法：
　　1.體外實驗：培養(yǎng)RA原代滑膜細(xì)胞，將RA滑膜細(xì)胞平均分為5組，分別標(biāo)記為空白對照組、SH25μg·ml-1組、SH50μg·ml-1組、SH100μg·ml-1組、SH200μg·ml-1組。按照上述濃度將SH分別加入到各SH干預(yù)組

2、中，同時，用等量的生理鹽水加入到空白對照組中，如此連續(xù)培養(yǎng)7天后用MTT(3-（4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide，MTT)法檢測各組吸光度值，分析SH對于體外RA滑膜細(xì)胞增殖的抑制作用。
　　2.體內(nèi)實驗：50只Wistar大鼠隨機分成5組：空白對照組、模型組、SH130mg·kg-1組、SH260mg·kg-1組、SH520mg·kg-1

3、組。建立大鼠膠原誘導(dǎo)的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（Collagen Induced Arthritis，CIA）模型，計數(shù)方法測定大鼠關(guān)節(jié)炎指（Arthritis Index，AI），稱重法比較大鼠的體重變化，HE染色光學(xué)顯微鏡下觀察實驗大鼠關(guān)節(jié)病理形態(tài)變化，酶聯(lián)免疫吸附法（Elisa）檢測實驗大鼠血清中細(xì)胞因子白介素（IL-6）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）、蛋白激酶A（PKA）、cAMP水平及Tunel法檢測大鼠滑

4、膜細(xì)胞凋亡情況。
　　結(jié)果：
　　1.體外實驗：與空白對照組相比，SH干預(yù)組的滑膜細(xì)胞增殖率明顯降低，在SH25μg·ml-1組、SH50μg·ml-1組、SH100μg·ml-1組及SH200μg·ml-1組之間呈現(xiàn)出劑量效應(yīng)關(guān)系；本實驗中，當(dāng)200μg·ml-1SH時達(dá)到最大抑制率。
　　2.體內(nèi)實驗：與模型組比較，SH干預(yù)組實驗大鼠的關(guān)節(jié)炎指數(shù)降低，細(xì)胞因子水平減低，滑膜細(xì)胞凋亡明顯增加，且在SH130mg·kg