生精膠囊改善雄性去勢(shì)大鼠勃起功能的研究.pdf

1、勃起功能障礙（erectile dysfunction，ED）是一種男性性功能疾病，現(xiàn)已成為中老年男性最常見(jiàn)的男性病。流行病學(xué)調(diào)查顯示ED的發(fā)病率仍在不斷增高。隨著人口老齡化加速，ED已成為人們的一個(gè)重大的健康問(wèn)題。因此，人們一直在努力發(fā)掘一種有效并且副作用較少的藥物來(lái)治療ED。磷酸二酯酶5抑制劑（PDE5is）被認(rèn)為是目前治療ED的一線用藥，但該類(lèi)藥物起效的前提是陰莖海綿體血管內(nèi)皮功能和NO（一氧化氮）生物利用度的的完整性，因此對(duì)老齡

2、化、慢性疾病或前列腺癌根治術(shù)后等引起的難治性 ED人群很難達(dá)到滿意的療效。據(jù)統(tǒng)計(jì)，在使用 PDE5is治療的ED患者中，治療失敗者多達(dá)35％。盡管陸續(xù)有一些新型的 PDE5is（如他達(dá)拉非、伐地那非等）上市，但是仍然存在一些毒副作用和禁忌癥，再加之價(jià)格昂貴，使用時(shí)提倡合理用藥和謹(jǐn)慎用藥。
　　在中國(guó)，有部分患者，特別是老齡患者更傾向于選擇傳統(tǒng)中藥來(lái)增強(qiáng)勃起功能或治療ED。盡管大多數(shù)傳統(tǒng)中藥的療效不如PDE5is顯著，但已有一些研究

3、表明傳統(tǒng)中醫(yī)藥在治療ED上具有一定的發(fā)展前景。“生精膠囊”是由人參、冬蟲(chóng)夏草、淫羊藿等19味中藥制成的現(xiàn)代中藥制劑，臨床上主要應(yīng)用于改善少弱精患者的精液質(zhì)量，常用于治療男性不育癥。近年來(lái)，在臨床上我們觀察到，伴有ED的不育癥患者服用生精膠囊治療后其勃起功能有不同程度的改善，但其具體的作用途徑及機(jī)制并不清楚。
　　目的:
　　本實(shí)驗(yàn)擬在建立去勢(shì)動(dòng)物模型的基礎(chǔ)上，通過(guò)測(cè)定大鼠陰莖陰莖海綿體內(nèi)壓（intracavernosal p

4、ressure，ICP），進(jìn)一步在分子生物學(xué)水平對(duì)各組大鼠的陰莖海綿體組織進(jìn)行檢測(cè)，深入探討生精膠囊改善陰莖勃起功能的作用機(jī)制，為勃起功能障礙的治療策略提供可靠的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:
　　1、成年雄性SD大鼠30只，隨機(jī)分為假手術(shù)組、去勢(shì)組、生精膠囊低劑量組、生精膠囊中劑量組、生精膠囊高劑量組和睪酮組，每組5只。假手術(shù)組作為正常對(duì)照，其余組均行雙側(cè)睪丸切除術(shù)建立勃起功能障礙模型。術(shù)后假手術(shù)組、去勢(shì)組給予蒸餾水灌胃，每天一次

5、；生精膠囊低、中、高劑量組分別給予155.1 mg/（kg?d）、310.2mg/（kg?d）、620.4mg/（kg?d）劑量的生精膠囊混懸液每天灌胃一次；睪酮組給予十一酸睪酮26.3mg/kg肌注，每四周一次，每周記錄各組大鼠體重。干預(yù)8周后檢測(cè)陰莖海綿體內(nèi)壓（ICP），測(cè)定血清睪酮水平以及稱(chēng)重前列腺和精囊腺組織。
　　2、ICP檢測(cè)完畢后，剖取陰莖海綿體組織，行Masson’s三色染色法檢測(cè)陰莖組織中平滑肌與膠原纖維的比例；

6、免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)陰莖組織中α-肌動(dòng)蛋白（α-SMA）及堿性調(diào)寧蛋白（ Calponin）的表達(dá)；熒光定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（QRT-PCR）和蛋白質(zhì)印跡法（Western blot）檢測(cè)陰莖組織中神經(jīng)型一氧化氮合酶（nNOS）、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）、內(nèi)皮型一氧化氮合酶（eNOS）及5型磷酸二酯酶（PDE5）mRNA和蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1、各組大鼠體質(zhì)量、附屬性腺器官、血清睪酮水平的變化
　　生

7、精膠囊治療組與去勢(shì)組間體質(zhì)量、前列腺重量、精囊腺重量及血清睪酮水平比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)；而較假手術(shù)組顯著降低，組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。
　　2、各組大鼠勃起功能參數(shù)的變化
　　各組大鼠間基礎(chǔ)ICP，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。在代表勃起功能的參數(shù)中（平均最大 ICP、曲線下面積 AUC、ICP/MAP），假手術(shù)組和睪酮組的值最高，而去勢(shì)組的值最低。生精膠囊治療組顯著高于去

8、勢(shì)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。
　　3、各組大鼠陰莖組織海綿體平滑肌分布的變化
　　去勢(shì)組平滑肌/膠原纖維比率較假手術(shù)及睪酮組顯著降低(P均<0.01)。生精膠囊治療組顯著高于去勢(shì)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。
　　4、各組大鼠陰莖組織免疫組織化學(xué)α-SMA和calponin蛋白的表達(dá)
　　去勢(shì)組的α-SMA和calponin表達(dá)水平顯著低于生精膠囊治療組、假手術(shù)組及睪酮組(P均<0.05)

9、。
　　5、各組大鼠陰莖組織一氧化氮合酶亞型及PDE5的mRNA及蛋白的表達(dá)
　　qRT-PCR和Western blot結(jié)果表明，生精膠囊治療組的nNOS、iNOS、eNOS及PDE5的mRNA及蛋白表達(dá)量均顯著高于去勢(shì)組(P均<0.05)，但均顯著低于假手術(shù)組和睪酮組(P均<0.05)。
　　結(jié)論:
　　1、生精膠囊顯著改善去勢(shì)大鼠的勃起功能。
　　2、生精膠囊不影響血清睪酮水平，表明生精膠囊改善大鼠勃