生精膠囊改善雄性去勢大鼠勃起功能的研究.pdf

1、勃起功能障礙（erectile dysfunction，ED）是一種男性性功能疾病，現(xiàn)已成為中老年男性最常見的男性病。流行病學調查顯示ED的發(fā)病率仍在不斷增高。隨著人口老齡化加速，ED已成為人們的一個重大的健康問題。因此，人們一直在努力發(fā)掘一種有效并且副作用較少的藥物來治療ED。磷酸二酯酶5抑制劑（PDE5is）被認為是目前治療ED的一線用藥，但該類藥物起效的前提是陰莖海綿體血管內(nèi)皮功能和NO（一氧化氮）生物利用度的的完整性，因此對老齡

2、化、慢性疾病或前列腺癌根治術后等引起的難治性 ED人群很難達到滿意的療效。據(jù)統(tǒng)計，在使用 PDE5is治療的ED患者中，治療失敗者多達35％。盡管陸續(xù)有一些新型的 PDE5is（如他達拉非、伐地那非等）上市，但是仍然存在一些毒副作用和禁忌癥，再加之價格昂貴，使用時提倡合理用藥和謹慎用藥。
　　在中國，有部分患者，特別是老齡患者更傾向于選擇傳統(tǒng)中藥來增強勃起功能或治療ED。盡管大多數(shù)傳統(tǒng)中藥的療效不如PDE5is顯著，但已有一些研究

3、表明傳統(tǒng)中醫(yī)藥在治療ED上具有一定的發(fā)展前景?！吧z囊”是由人參、冬蟲夏草、淫羊藿等19味中藥制成的現(xiàn)代中藥制劑，臨床上主要應用于改善少弱精患者的精液質量，常用于治療男性不育癥。近年來，在臨床上我們觀察到，伴有ED的不育癥患者服用生精膠囊治療后其勃起功能有不同程度的改善，但其具體的作用途徑及機制并不清楚。
　　目的:
　　本實驗擬在建立去勢動物模型的基礎上，通過測定大鼠陰莖陰莖海綿體內(nèi)壓（intracavernosal p

4、ressure，ICP），進一步在分子生物學水平對各組大鼠的陰莖海綿體組織進行檢測，深入探討生精膠囊改善陰莖勃起功能的作用機制，為勃起功能障礙的治療策略提供可靠的實驗依據(jù)。
　　方法:
　　1、成年雄性SD大鼠30只，隨機分為假手術組、去勢組、生精膠囊低劑量組、生精膠囊中劑量組、生精膠囊高劑量組和睪酮組，每組5只。假手術組作為正常對照，其余組均行雙側睪丸切除術建立勃起功能障礙模型。術后假手術組、去勢組給予蒸餾水灌胃，每天一次

5、；生精膠囊低、中、高劑量組分別給予155.1 mg/（kg?d）、310.2mg/（kg?d）、620.4mg/（kg?d）劑量的生精膠囊混懸液每天灌胃一次；睪酮組給予十一酸睪酮26.3mg/kg肌注，每四周一次，每周記錄各組大鼠體重。干預8周后檢測陰莖海綿體內(nèi)壓（ICP），測定血清睪酮水平以及稱重前列腺和精囊腺組織。
　　2、ICP檢測完畢后，剖取陰莖海綿體組織，行Masson’s三色染色法檢測陰莖組織中平滑肌與膠原纖維的比例；

6、免疫組織化學技術檢測陰莖組織中α-肌動蛋白（α-SMA）及堿性調寧蛋白（ Calponin）的表達；熒光定量逆轉錄-聚合酶鏈反應（QRT-PCR）和蛋白質印跡法（Western blot）檢測陰莖組織中神經(jīng)型一氧化氮合酶（nNOS）、誘導型一氧化氮合酶（iNOS）、內(nèi)皮型一氧化氮合酶（eNOS）及5型磷酸二酯酶（PDE5）mRNA和蛋白表達。
　　結果:
　　1、各組大鼠體質量、附屬性腺器官、血清睪酮水平的變化
　　生

7、精膠囊治療組與去勢組間體質量、前列腺重量、精囊腺重量及血清睪酮水平比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P均>0.05)；而較假手術組顯著降低，組間比較差異均有統(tǒng)計學意義(P均<0.05)。
　　2、各組大鼠勃起功能參數(shù)的變化
　　各組大鼠間基礎ICP，差異均無統(tǒng)計學意義(P均>0.05)。在代表勃起功能的參數(shù)中（平均最大 ICP、曲線下面積 AUC、ICP/MAP），假手術組和睪酮組的值最高，而去勢組的值最低。生精膠囊治療組顯著高于去

8、勢組，差異有統(tǒng)計學意義(P均<0.05)。
　　3、各組大鼠陰莖組織海綿體平滑肌分布的變化
　　去勢組平滑肌/膠原纖維比率較假手術及睪酮組顯著降低(P均<0.01)。生精膠囊治療組顯著高于去勢組，差異有統(tǒng)計學意義(P均<0.05)。
　　4、各組大鼠陰莖組織免疫組織化學α-SMA和calponin蛋白的表達
　　去勢組的α-SMA和calponin表達水平顯著低于生精膠囊治療組、假手術組及睪酮組(P均<0.05)

9、。
　　5、各組大鼠陰莖組織一氧化氮合酶亞型及PDE5的mRNA及蛋白的表達
　　qRT-PCR和Western blot結果表明，生精膠囊治療組的nNOS、iNOS、eNOS及PDE5的mRNA及蛋白表達量均顯著高于去勢組(P均<0.05)，但均顯著低于假手術組和睪酮組(P均<0.05)。
　　結論:
　　1、生精膠囊顯著改善去勢大鼠的勃起功能。
　　2、生精膠囊不影響血清睪酮水平，表明生精膠囊改善大鼠勃