網(wǎng)狀原角藻(Protoceratium reticulatum)的鑒定與毒素檢測(cè)研究.pdf

1、分類號(hào)分類號(hào)密級(jí)UDC編號(hào)碩士學(xué)位論文網(wǎng)狀原角藻（Protoceratiumreticulatum）的鑒定與毒素檢測(cè)研究韋寧1212014指導(dǎo)教師姓名梁玉波研究員趙文教授專業(yè)名稱水生生物學(xué)論文答辯日期年月日學(xué)位授予日期年月日摘要蝦夷扇貝毒素(YessotoxinsYTXs)是近年來發(fā)現(xiàn)的一類聚醚類海洋生物毒素，主要由甲藻門中的網(wǎng)狀原角藻產(chǎn)生，另外多邊舌甲藻和具刺膝溝藻也被報(bào)道可產(chǎn)此類毒素。此前世界多個(gè)國家和地區(qū)均有檢出，該毒素不像傳統(tǒng)的

2、腹瀉性貝毒會(huì)引起腹瀉效應(yīng)，但會(huì)對(duì)心、肝臟、神經(jīng)系統(tǒng)等組織器官造成損傷，是一種對(duì)人類和生態(tài)系統(tǒng)具有潛在危害的脂溶性毒素。我國于近年來首次檢出了YTX及其衍生物，但至今未有網(wǎng)狀原角藻或其他兩種產(chǎn)毒藻藻華的報(bào)道。本文選取于大連長海海域分離鑒定的一株網(wǎng)狀原角藻，通過光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡對(duì)其形態(tài)學(xué)信息進(jìn)行描述，采取單細(xì)胞PCR分析其ITS序列信息；使用液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法(LCMS)對(duì)其游動(dòng)細(xì)胞和底棲孢囊的產(chǎn)毒狀況進(jìn)行定性定量分析；并對(duì)二者的周年

3、種群動(dòng)態(tài)，以及該海域蝦夷扇貝的YTXs進(jìn)行分析。從形態(tài)學(xué)分析上看，該藻長略大于寬，平均長度為33.5μm，平均寬度為29.5μm，光鏡下可見游泳的鞭毛和黃綠色色素體；在熒光顯微鏡下可見各甲板上具有小孔的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，其甲片式為：3’1a6’’6’’’1p1’’’’；ITS序列表明，該藻株與日本的網(wǎng)狀原角藻藻株親緣關(guān)系最近。通過進(jìn)行LCMS毒素分析，本藻株的游動(dòng)細(xì)胞可產(chǎn)YTX，平均每細(xì)胞產(chǎn)毒量為101.25pg并有少量的HomoYTX產(chǎn)生，底

4、棲孢囊和游動(dòng)細(xì)胞的毒素組分一致，但毒素含量遠(yuǎn)高于游動(dòng)細(xì)胞，平均每細(xì)胞產(chǎn)YTX的量為8910.78pg。網(wǎng)狀原角藻的游動(dòng)細(xì)胞具有明顯的季節(jié)分布特征，在春季，細(xì)胞豐度逐月上升，四月份達(dá)到最高，之后快速減少，五月份僅有極少量檢出，此后再無檢出。而孢囊則呈現(xiàn)近雙峰形的趨勢(shì)，在3月和7月各出現(xiàn)了一個(gè)高值，而最低值則出現(xiàn)在9月。蝦夷扇貝體內(nèi)的YTXs在整年的樣品中均有檢出，其趨勢(shì)與孢囊豐度的變化相似，但相對(duì)而言有滯后的現(xiàn)象。在5月和10月各有一個(gè)峰

5、值出現(xiàn)。但從整年數(shù)據(jù)來看，長海海域蝦夷扇貝體內(nèi)YTXs含量不高，未超過歐盟規(guī)定的1mgKg食用安全標(biāo)準(zhǔn)綜上所述，網(wǎng)狀原角藻是長海海域一種可產(chǎn)YTXs的有毒赤潮藻類。該藻主要出現(xiàn)在春季，是一種在低水溫下即可產(chǎn)生藻華的甲藻。且底棲孢囊很可能是蝦夷扇貝所含YTX的主要來源。以上研究是國內(nèi)首次對(duì)YTXs產(chǎn)毒藻類的生物學(xué)和生態(tài)學(xué)信息進(jìn)行描述，其結(jié)果可以為網(wǎng)狀原角藻種群的監(jiān)測(cè)、毒素分析提供參考方法；為有關(guān)部分合理制定監(jiān)測(cè)預(yù)警策略，為有效降低網(wǎng)狀原角