水體中多種藻毒素的檢測(cè)方法研究.pdf

1、近年來我國(guó)各大淡水湖泊的富營(yíng)養(yǎng)化現(xiàn)象日益嚴(yán)重，富營(yíng)養(yǎng)化水體中藍(lán)藻水華的爆發(fā)以及有毒藍(lán)藻的代謝產(chǎn)物已經(jīng)成為一個(gè)全世界關(guān)注的公眾衛(wèi)生問題。上海地處長(zhǎng)江和太湖流域下游，目前主要以黃浦江上游和長(zhǎng)江為飲用水水源地，其中黃浦江發(fā)源于太湖流域的淀山湖，其供水量占全市原水取水量的80％左右，而淀山湖的富營(yíng)養(yǎng)化及藻毒素問題日益嚴(yán)重，因此保障黃浦江上游水源地的水質(zhì)安全對(duì)于上海市人民的飲用水安全有重要意義。
　　 微囊藻、節(jié)球藻和柱胞藻毒素是一類具有

2、強(qiáng)肝臟毒性的藍(lán)藻毒素，眾多研究都表明原發(fā)性肝癌的發(fā)病率與飲用藻毒素污染的水有關(guān)，但國(guó)內(nèi)除微囊藻毒素外，其他兩類藻毒素的免疫分析方法研究幾乎空白。這三種藻毒素在上海市的地表水中，尤其是在爆發(fā)藍(lán)藻水華的水體中普遍存在。低濃度、高干擾是藻毒素分析中的難題，對(duì)此，本文對(duì)水體中三大類肝毒素的免疫分析方法進(jìn)行了研究，把SPE技術(shù)和ELISA檢測(cè)相結(jié)合，采用比較研究的方法，對(duì)微囊藻、節(jié)球藻和柱胞藻藻毒素的富集前處理作了重點(diǎn)研究，建立了快速、靈敏、可靠

3、的用于ELISA分析的前處理方法，同時(shí)將該方法用于上海市水源地及自來水中這三種藻毒素的污染狀況調(diào)查，這不僅能為改善供水水質(zhì)提供可靠的參考資料，也為上海地區(qū)水質(zhì)的監(jiān)控提供了強(qiáng)有力的技術(shù)支持，同時(shí)本方法的研究結(jié)果也能為建立這三類藻毒素的ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。研究分為兩部分：(1)三種藻毒素免疫分析的前處理研究；(2)上海市供水系統(tǒng)中三種藻毒素污染的初步調(diào)查。
　　 主要研究結(jié)果如下：
　　 1、對(duì)微囊藻和節(jié)球藻毒素，首

4、先水樣用0.22μ m水相濾膜過濾，以3-4mL/min的速度流過經(jīng)10mL甲醇和10mL純水活化的C18柱，上樣后10mL純水淋洗，12mL甲醇洗脫，洗脫液在35℃條件下氮?dú)獯蹈珊笥眉兯ㄈ莸?mL，4℃保存待測(cè)。結(jié)果表明該方法針對(duì)微囊藻和節(jié)球藻毒素的ELISA檢測(cè)能保證有較好的回收率，加標(biāo)回收率可分別達(dá)到91.4％和94.3％。
　　 2、對(duì)柱孢藻毒素，用10mL甲醇和10mL純水活化碳黑固相萃取柱，水樣過濾后(0.22μ

5、m)以2-3mL/min的速度上樣，用10mL甲醇淋洗后再用12mL含0.1％三氟乙酸的甲醇洗脫柱胞藻毒素，氮?dú)獯蹈珊笥?.1％氨水定容到1mL待測(cè)。結(jié)果表明這種前處理方法對(duì)柱胞藻毒素的ELISA檢測(cè)能保證有較好的回收率，加標(biāo)回收率77％。
　　 3、調(diào)查了上海市8個(gè)水源地水樣以及7個(gè)市區(qū)居民自來水采樣點(diǎn)的三類藻毒素含量。結(jié)果表明，水源水中的三類藻毒素都具有明顯的季節(jié)性：微囊藻和節(jié)球藻毒素的濃度分別在8月份、9月份達(dá)到最高值，8

6、個(gè)采樣點(diǎn)中S5(米市渡)、S6(金山)的濃度較高，S8(南沙港)較低；而柱孢藻毒素12月份含量最高，以S7(松浦大橋)、S6(金山)的濃度較高，S1(淀山湖)、S8(南沙港)較低。自來水中，三類藻毒素也具有明顯的季節(jié)性，都是7-9月份濃度較高，7個(gè)采樣點(diǎn)中以徐匯和閔行的三類藻毒素最高，川沙的三類藻毒素含量最低。
　　 總體來說，上海市水源地源水及居民自來水中的微囊藻毒素的濃度都遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于我國(guó)及WHO規(guī)定的1μg/L的安全標(biāo)準(zhǔn)，也低