藻毒素的檢測、去除及藻藍蛋白穩(wěn)定性的研究.pdf

1、近年來，巢湖藍藻爆發(fā)頻繁，水華新鮮藍藻資源化利用越來越得到重視，尤其是水華藍藻中藻藍蛋白的提取純化。研究表明，高純度藻藍蛋白具有良好的功效，如抗炎性、抗癌性、抗氧化性等。但是水華藍藻中的藻毒素危害很大，它是一種肝毒素，具有強烈的促癌（肝癌）作用。因此，本研究以巢湖新鮮水華藍藻為原料，凍融破壁后獲得藻藍蛋白粗提液，通過兩步鹽析法純化獲得藻藍蛋白溶液，優(yōu)化建立固相萃取—高效液相色譜法測定藻毒素的含量，研究超聲波法、混凝—超聲波組合法對提取純

2、化各階段中藻毒素的去除效果，同時研究了兩步鹽析后藻藍蛋白溶液的保存條件。主要內容摘要如下:
　　1.固相萃取—高效液相色譜法測定藻藍蛋白溶液中藻毒素含量。確定高效液相色譜法測定藻毒素含量所需流動相種類及比例、檢測波長、柱溫、流速等條件，并在此基礎上優(yōu)選了固相萃取法提取富集藻毒素過程中淋洗液及洗脫液濃度。最終確立藻毒素檢測的條件為:流動相為甲醇∶0.01M乙酸銨=55∶45;波長為238nm;柱溫為30℃;流速為1ml/min。固相

3、萃取的最優(yōu)淋洗液濃度為20％甲醇溶液;洗脫液濃度為100％甲醇溶液。
　　2.超聲波法對藻毒素去除效果的研究。以固相萃取—高效液相色譜法測定藻毒素含量為基礎，檢測兩步鹽析工藝提取純化藻藍蛋白溶液各階段藻毒素的含量發(fā)現(xiàn)，藻毒素大部分位于粗提液及兩步鹽析上清液中。針對藻藍蛋白粗提液，首先研究了超聲功率、超聲時間、溶液酸堿度對藻毒素去除效果;針對兩步鹽析上清液，研究了超聲功率、超聲時間、溶液酸堿度及混凝劑的添加對藻毒素去除效果，并對比單

4、獨混凝工藝、超聲工藝及超聲—混凝工藝后發(fā)現(xiàn)混凝超聲組合工藝對藻毒素的去除效果最優(yōu)。研究結果表明:當超聲功率為950W，超聲時間為10min，溶液偏中性且混凝劑硫酸鋁添加量為8mg/l時，藻毒素去除率最高。
　　3.巢湖藍藻藻藍蛋白穩(wěn)定性研究。實驗研究了溫度、pH值、凍融次數及添加劑等因素對兩步鹽析后藻藍蛋白溶液穩(wěn)定性的影響，確定了藻藍蛋白溶液保存的最優(yōu)條件。結果表明:低溫、中性條件下有利于藻藍蛋白溶液的保存;糖類、防腐劑、氧化劑、