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文檔簡介
1、目的:⑴探討兩色金雞菊黃酮成分馬里苷對胰島β細胞的保護作用及可能機制;⑵探討雪菊多糖對胰島β細胞的增殖活性和胰島素分泌情況的影響;⑶合成并鑒定馬里苷結(jié)構(gòu)類似物柚皮苷的人工完全抗原,為制備柚皮苷的單克隆抗體及建立相應(yīng)的免疫學(xué)分析方法敲除小分子柚皮苷奠定基礎(chǔ)。
方法:①運用四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT)檢測馬里苷對MIN6細胞增殖的影響;酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測胰島素分泌量;Western Blot方法檢測細胞中BAX,Bcl
2、-2蛋白表達水平;②運用四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT)檢測雪菊多糖對MIN6細胞增殖的影響;酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測胰島素分泌量;③采用過碘酸鹽氧化法合成柚皮苷人工抗原;紫外光譜和薄層色譜法鑒定人工抗原偶聯(lián)是否成功。
結(jié)果:⑴與正常對照組比較,高糖高脂模型組MIN6細胞存活率明顯降低(P<0.05),不同濃度馬里苷干預(yù)組MIN6細胞增殖均顯著增加(P<0.05)。與正常對照組比較,高糖高脂模型組MIN6細胞胰島素分泌量明顯
3、降低(P<0.05);與高糖高脂模型組比較,馬里苷給藥組MIN6細胞胰島素分泌量明顯升高(P<0.05)。Western印跡顯示,與正常對照組比較,BAX蛋白表達量模型組增多,給藥組隨濃度遞增依次減少;Bcl-2蛋白相對模型組減少,給藥組隨濃度增加依次增多(P<0.05);⑵與正常對照組比較,高糖高脂模型組細胞存活率明顯降低(P<0.05),不同濃度雪菊多糖干預(yù)組MIN6細胞增殖均顯著增加(P<0.05)。與正常對照組比較,高糖高脂模型
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