兩種合成肽對單核細胞活性的影響.pdf

1、目的:胸腺肽是一類胸腺上皮細胞產生的對淋巴細胞分化、成熟和免疫活性具有重要作用的多肽激素的總稱，又稱胸腺激素或胸腺素。外周血單個核細胞包括淋巴細胞和單核細胞。巨噬細胞不僅參與機體固有免疫應答，同時也是適應性免疫應答的啟動者，是固有免疫應答和適應性免疫應答的橋梁。T淋巴細胞是機體執(zhí)行細胞免疫功能的主要成員，可分為若干亞群，各有其特異的表面標志和功能。根據其表達CD分子的不同可將其分為CD4+T細胞、CD8+T細胞等;根據其功能特征可將其分

2、為輔助T細胞(helper T cell，Th cell)、調節(jié)性T細胞(regulatoryT cell，Treg cell)、細胞毒性T細胞(cytotoxic T lymphocyte，CTL)等亞群。巨噬細胞表面共刺激分子的變化、T淋巴細胞亞群的比例及分泌細胞因子的種類，可以反映機體免疫功能的狀態(tài)。因此，本研究以健康人外周血單個核細胞和THP-1細胞作為研究對象，研究兩種合成肽對免疫細胞活性的作用。
　　方法:
　　

3、1、分別用不同濃度的兩種合成肽α1和α2及對照肽（胸腺肽）作用于正常人外周血單個核細胞48h和72h，流式細胞術檢測CD4+和CD8+T細胞的百分數。
　　2、分別用不同濃度的兩種合成肽α1和α2及對照肽（胸腺肽）作用于正常人外周血單個核細胞48h和72h后，用流式液相多重蛋白定量技術(CBA)檢測上清中IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α和IL-1β的濃度。
　　3、分別用不同濃度的兩種合成肽α1和α2及對照肽(胸腺

4、肽)作用于人單核細胞株THP-1細胞24h和48h后，用流式液相多重蛋白定量技術檢測細胞培養(yǎng)上清中IL-1β和TNF-α的表達水平;用流式技術檢測細胞表面CD86和HLAII類分子的表達水平;CCK-8法檢測兩種合成肽對THP-1細胞增殖的影響;中性紅法檢測兩種合成肽對THP-1細胞吞噬功能的影響。
　　結果:
　　1、兩種合成肽對人外周血單個核細胞活性的影響
　　1.1 CBA檢測的結果顯示:
　　1.1.1與

5、陰性對照組相比，不同濃度的兩種合成肽作用于外周血單個核細胞48小時后，TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10的分泌明顯升高，尤以合成肽α1在濃度為10mg/ml時致其分泌TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10顯著升高(P＜0.05);不同濃度的兩種合成肽與陽性對照組相比，除合成肽α1(10mg/ml)外均無顯著差異(P＞0.05)。
　　1.1.2與陽性和陰性對照組相比，兩種合成肽作用外周血單個核細胞72h后，TNF-

6、α、IL-1β、IL-6的分泌均無顯著差異(P＞0.05);而IL-2的分泌在兩種合成肽作用單個核細胞48h和72h后與對照組相比均無顯著差異(P＞0.05)。
　　1.2流式細胞檢測結果顯示:與對照組相比，兩種合成肽對外周血單個核細胞CD4+T、CD8+T細胞數量的影響無顯著差異（P＞0.05）。
　　2、兩種合成肽對單核細胞株THP-1活性的影響:
　　2.1與陰性對照組相比，濃度為5 mg/ml和10mg/ml的

7、合成肽α2作用THP-1細胞24h后，細胞表達HLAII類分子顯著增加(P＜0.05)。而其它濃度的合成肽不能引起HLAII類分子表達增加。與陰性和陽性組相比，兩種合成肽致THP-1表達CD86分子無顯著改變(P＞0.05)。
　　2.2與陰性和陽性組相比，兩種合成肽均不能明顯促進THP-1細胞的增殖和吞噬。
　　2.3陰性組、陽性組、兩種合成肽各組中均未檢測到TNF-α和IL-1β。
　　結論:
　　1、兩種合