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文檔簡(jiǎn)介
1、目的：觀察糖基化終產(chǎn)物(advanced glyeation end products.AGEs)對(duì)人單核細(xì)胞(cultured human monocytes，U937)的細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子(extracellularmatrix metalloproteinase inducer，EMMPRIN)表達(dá)的影響及對(duì)MMP-2和MMP-9活性的影響。
方法：運(yùn)用體外制備的糖基化修飾的牛血清白蛋白(AGE-bovin
2、e serum albumiN,AGE-BSA)，以不同濃度(O、50、100、200、400mg/l) AGE-BSA干預(yù)24小時(shí)及同一濃度200mg/l）不同時(shí)間(0、8、16、24、48h)干預(yù)U937，并用1640組及BSA（200mg/l）組為對(duì)照，用RT-PCR（逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）檢測(cè)各組EMMPRIN的基因表達(dá)；Western-blot（蛋白免疫印跡）檢測(cè)各組EMMPRIN的蛋白表達(dá)。以不同濃度AGE-BSA(50、4
3、00 mg/l)干預(yù)U937 24小時(shí)，并用1640組及BSA（400mg/l）組為對(duì)照，以明膠酶譜法測(cè)定各組上清中MMP-2及MMP-9的活性。
結(jié)果：1、以不同濃度的AGE-BSA干預(yù)U937細(xì)胞24小時(shí)，50mg/l（1.348+-0.048）、100mg/l (0.923+-0.041)、200mg/l(0.779+-0.052)、400mg/1 (0.499+-0.038) AGE-BSA干預(yù)組的EMMPRIN基
4、因的表達(dá)明顯低于1640組（1.551+-0.060）及BSA對(duì)照組（1.607+-0.058），并隨著AGE-BSA濃度的增高而逐漸下降(P<0.05)。2、用濃度為200mg/l的AGE-BSA干預(yù)U937細(xì)胞8小時(shí)(1.373+-0.046)、16小時(shí)（1.098+-0.038）、24小時(shí)（0.860+-0.042）、48小時(shí)（0.663+-0.032），EMMPRJN基因的表達(dá)逐漸降低，且低于1640組（1.665+-0.054
5、）及BSA組（1.624+-0.061），并隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸下降(P<0.05).3、以50mg/1(0.804+-0.024)、100mg/l(0.796+-0.042)、200mg/l(0.789+-0.045)、400mg/l（0.779+-0.028）的AGE-BSA干預(yù)U937 24小時(shí)，各組EMMPRIN蛋白表達(dá)量之間無(wú)明顯差異(P>0.05)。4、以濃度為200mg/l的AGE-BSA干預(yù)U937細(xì)胞16小時(shí)（0.80
6、9+-0.024）、24小時(shí)（0.771+-0.036）、48小時(shí)（0.786+-0.045），各組EMMPRIN蛋白表達(dá)量之間無(wú)明顯差異(P>0.05)。5、以不同濃度的AGE-BSA干預(yù)U937細(xì)胞24小時(shí)，50mg/l（0.89+-0.124）及400mg/l AGE-BSA（0.775+-0.118）干預(yù)組的MMP-2的酶解量明顯低于1640組（1.185+-0.131）及BSA組（1.11+-0.15）(P<0.05);50m
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