糖基化終產(chǎn)物對血管平滑肌細胞表達分泌甲狀旁腺激素相關肽及細胞鈣化的影響.pdf

1、目的:觀察糖基化終產(chǎn)物(AGEs)促體外培養(yǎng)的人血管平滑肌細胞鈣化的影響，及其對血管平滑肌細胞表達及分泌甲狀旁腺激素相關肽(PTHrP)功能的影響，并探討AGEs影響血管平滑肌細胞鈣化發(fā)生的相關機制。
　　方法:傳代培養(yǎng)人血管平滑肌細胞，體外制備糖基化修飾的牛血清白蛋白(AGE-BSA)，用孵育好的、不同濃度的AGE-BSA與人血管平滑肌細胞共培養(yǎng)相同時間，根據(jù)干預條件的不同，分為無干預的空白組、400mg/LBSA陰性對照組、5

2、0、100、200、400mg/L AGE-BSA干預組;分別檢測各組細胞總鈣含量及堿性磷酸酶(ALP)活性;酶聯(lián)免疫吸附法檢測各組細胞甲狀旁腺激素相關肽(PTHrP)的分泌量;實時熒光定量逆轉錄聚合酶鏈反應檢測PTHrP、核心結合因子α亞單位1（cbfα1）及骨形成蛋白2(BMP-2)等基因在各組細胞中的表達量。
　　結果:糖基化終產(chǎn)物(AGEs)增加血管平滑肌細胞中的鈣含量、提高堿性磷酸酶活性(P＜0.05)，且隨著干預濃度的

3、增加，細胞的鈣含量及堿性磷酸酶活性逐漸增加，呈濃度依賴性;AGEs促進cbfα1、BMP-2及甲狀旁腺激素相關肽(PTHrP)等基因mRNA在血管平滑肌細胞的表達，且隨著干預濃度的增加，以上基因的相對表達量均呈逐漸增加的趨勢，這在較高濃度組較為顯著(P＜0.05);同時也觀察到不同濃度AGEs可抑制PTHrP在血管平滑肌細胞的分泌量(P＜0.05)，且隨著AGEs干預濃度增加，PTHrP分泌量呈逐漸減少的趨勢，然而，200 mg/L A