大鼠血管平滑肌細(xì)胞蛋白組學(xué)的研究以及尼古丁對(duì)血管平滑肌細(xì)胞蛋白和基因表達(dá)影響的研究.pdf

1、 本文在實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用蛋白組學(xué)的研究方法觀察了尼古丁刺激組(處理組)血管平滑肌細(xì)胞和非刺激組(對(duì)照組)血管平滑肌細(xì)胞的蛋白表達(dá)圖譜，并選擇2倍以上差異表達(dá)的蛋白質(zhì)(表達(dá)上調(diào)或下調(diào))利用肽指紋質(zhì)譜和串聯(lián)質(zhì)譜法對(duì)其進(jìn)行鑒定。并在隨后的實(shí)驗(yàn)中采用熒光定量RT-PCR方法對(duì)這些蛋白的編碼基因進(jìn)行了體外擴(kuò)增，了解其基因的表達(dá)變化。目的是采用先進(jìn)的科研手段，從分子生物學(xué)水平對(duì)尼古丁的致病機(jī)理進(jìn)行探討。 剖析了大鼠血管平滑肌細(xì)胞雙向電泳技術(shù)

2、平臺(tái)的建立目的強(qiáng)調(diào)了蛋白組學(xué)中最重要的核心技術(shù)即是蛋白質(zhì)雙向電泳，雙向電泳的分辨率涉及樣品處理、等電聚焦、SDS-PAGE凝膠電泳、染色等技術(shù)，為了獲得良好的大鼠血管平滑肌細(xì)胞的蛋白表達(dá)譜，我們對(duì)雙向電泳實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行優(yōu)化處理。 本文運(yùn)用該項(xiàng)技術(shù)，我們可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量或定性分析。定量分析包括絕對(duì)定量和相對(duì)定量分析。并應(yīng)用熒光相對(duì)定量的簡(jiǎn)要計(jì)算方法2-△△CT對(duì)尼古丁引起的基因表達(dá)變化作出了相對(duì)定量分析。發(fā)現(xiàn)，尼古丁可