SUVmax在淋巴瘤中的診斷價值及相關(guān)分子(BCMA,RasGRP4)在淋巴瘤診斷應(yīng)用中的探索.pdf

1、本文從以下幾方面論述：
　　第一部分 18F-PET/CT對淋巴瘤的診斷及最大標(biāo)準(zhǔn)攝取值(SUVmax)的應(yīng)用價值
　　目的：
　　探討18F-PET/CT對淋巴瘤診斷的準(zhǔn)確率及最大標(biāo)準(zhǔn)攝取值(SUVmax)在實(shí)際臨床應(yīng)用中的指導(dǎo)意義。
　　方法：
　　回顧性分析2012年1月至2014年2月間100例原發(fā)淋巴瘤患者的PET-CT顯像結(jié)果，所有病例均以病理確診為金標(biāo)準(zhǔn)，并且均未進(jìn)行手術(shù)或者化療等任何干預(yù)措施

2、。分析PET/CT診斷的準(zhǔn)確率并按病理類型分組，將各類型原發(fā)淋巴瘤患者SUVmax進(jìn)行比較，并且在彌漫大B淋巴瘤患者中比較SUVmax在不同BCL-2分子表達(dá)、性別、年齡、是否骨轉(zhuǎn)移之間的差別及與增值指數(shù)Ki-67表達(dá)的相關(guān)性。所有數(shù)據(jù)均進(jìn)行t檢驗或方差分析，數(shù)據(jù)為非正太分布或方差不齊時采用秩和檢驗，用Pearson相關(guān)性分析檢驗SUVmax與Ki-67之間的相關(guān)關(guān)系。
　　結(jié)果：
　　100例經(jīng)病理證實(shí)的淋巴瘤患者中，霍奇

3、金病5例，非霍奇金淋巴瘤95例，后者包括60例彌漫大B細(xì)淋巴瘤，8例濾泡淋巴瘤，7例NK/T細(xì)胞淋巴瘤，8例外周T細(xì)胞淋巴瘤，黏膜相關(guān)及套細(xì)胞淋巴瘤各4例，4例確診淋巴瘤但仍未明確具體病理類型。PET-CT誤診10例，誤診率為10％，其中6例發(fā)生在胃及結(jié)腸并且其中2例PET-CT表現(xiàn)無任何異常。按病理類型分組，霍奇金病最大標(biāo)準(zhǔn)攝取值（SUVmax）為16.8±9.3，非霍奇金淋巴瘤為17.0±9.1，其中彌漫大B為18.9±8.9，濾泡

4、淋巴瘤為7.8±5.4NK/T為18.7±6.6，外周T細(xì)胞淋巴瘤為16.4±8.9，經(jīng)統(tǒng)計分析，霍奇金病與非霍奇金淋巴瘤SUVmax不存在統(tǒng)計學(xué)差異(x2=0.0136，p=0.9071)。在非霍奇金淋巴瘤中，彌漫大B淋巴瘤與濾泡淋巴瘤、濾泡淋巴瘤與NK/T淋巴瘤、濾泡淋巴瘤與外周T細(xì)胞淋巴瘤之間SUVmax均存在統(tǒng)計學(xué)差異(p值分別為0.0004，0.0078，0.0117)。在彌漫大B患者中，SUVmax在BCL-2不同表達(dá)（陽性

5、:18.3±7.8，陰性:24.5±10.9，t=1.6p＞0.05）、不同年齡階段（按照聯(lián)合國年齡劃分規(guī)定分為青年組((＜44歲，14.6±3.9)中年組（45～59歲，18.6±8.1）老年組（＞60歲，20.9±10.5）F=1.53，p＞0.05）、不同性別（男，18.9±9.1、女，19.2±9.3，t=-0.12，p＞0.05）是否發(fā)生骨轉(zhuǎn)移(轉(zhuǎn)移:20.4±1.2，未轉(zhuǎn)移:19.6±8.7，x2=0.1，p＞0.05)中均

6、無統(tǒng)計學(xué)差異。SUVmax與增值指數(shù)ki-67的表達(dá)率存在相關(guān)性（相關(guān)系數(shù)r=0.33，p=0.018）。
　　結(jié)論：
　　PET-CT在原發(fā)性淋巴瘤的診斷中具有重要意義，最大標(biāo)準(zhǔn)攝取值（SUVmax）在不同的淋巴瘤亞型鑒別診斷中具有一定的指導(dǎo)意義，并且SUVmax與Ki-67表達(dá)相關(guān)，一定程度上反應(yīng)淋巴瘤增殖能力。
　　第二部分 BCMA及RasGRP4分子在淋巴瘤中的表達(dá)及對腫瘤細(xì)胞凋亡的影響
　　目的：

7、r>　　通過對與淋巴瘤發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)的BCMA、RasGRP4分子的研究，期望開發(fā)相關(guān)的影像診斷分子探針，應(yīng)用于臨床診斷及治療。
　　方法：
　　通過基因芯片發(fā)現(xiàn)目標(biāo)分子BCMA及RasGRP4。收集彌漫大B淋巴瘤、濾泡淋巴瘤、Burkitt細(xì)胞淋巴瘤、人黏膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤、小淋巴細(xì)胞淋巴瘤及漿細(xì)胞淋巴瘤等各類型、各不同惡性級別的經(jīng)病理確診的淋巴瘤病例石蠟塊，免疫組化驗證BCMA的表達(dá)情況，通過電轉(zhuǎn)相應(yīng)的cDNA在R

8、aji淋巴瘤細(xì)胞系里驗證該分子對淋巴瘤的細(xì)胞凋亡的影響。同樣通過免疫組化驗證RasGRP4分子在淋巴瘤中的表達(dá)，同時，收集新鮮淋巴結(jié)通過研磨后流式分選正常B細(xì)胞與彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞系SUDHL-4在weStem水平檢測RasGRP4蛋白表達(dá)差異，電轉(zhuǎn)相應(yīng)shRNA達(dá)到在彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞系里驗證RasGRP4對凋亡的影響。
　　結(jié)果：
　　對29例淋巴瘤病例與5例正常對照淋巴結(jié)組織進(jìn)行免疫組化染色后發(fā)現(xiàn)，在彌漫大B淋巴瘤、濾

9、泡淋巴瘤、Burkitt細(xì)胞淋巴瘤、人黏膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤、小淋巴細(xì)胞淋巴瘤及漿細(xì)胞淋巴瘤等各類型淋巴瘤中，BCMA的表達(dá)均低于正常對照組，并且在收集到的不同級別的濾泡淋巴瘤中，BCMA分子的表達(dá)表現(xiàn)出與惡性級別的相關(guān)性，惡性級別越高，BCMA表達(dá)越低。Raji細(xì)胞系電轉(zhuǎn)BCMA的相應(yīng)cDNA質(zhì)粒及對照質(zhì)粒后，在48及72小時時間點(diǎn)檢測均發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染組的早期及晚期凋亡均遠(yuǎn)高于對照組，48小時，轉(zhuǎn)染了目的cDNA的Raji細(xì)胞早期凋亡細(xì)胞占

10、總細(xì)胞的比例為4.69％，對照組為2.32％，晚期凋亡及壞死細(xì)胞比例在轉(zhuǎn)染組為12.81％，對照組為7.65％;在72小時，早期和晚期凋亡比例在兩組中分別為11.79％，6.38％及3.43％，2.14％。免疫組化和westem均驗證了RasGRP4分子在彌漫大B淋巴瘤中的表達(dá)遠(yuǎn)高于正常淋巴結(jié)及B細(xì)胞，在彌漫大B淋巴瘤中電轉(zhuǎn)相應(yīng)的shRNA沉默RasGRP4的表達(dá)后，電轉(zhuǎn)組的凋亡率明顯高于對照組，在48小時，RasGRP4基因沉默組SU

11、DHL-4細(xì)胞早期及晚期凋亡細(xì)胞占總細(xì)胞的比例分別為4.21％及0.97％，對照組為1.39％及0.3％，轉(zhuǎn)染6天后檢測，shRNA組的SUDHL-4細(xì)胞晚期凋亡細(xì)胞占總細(xì)胞的比例為6.35％，對照組為3.89％。
　　結(jié)論：
　　BCMA在多種淋巴瘤亞型中表達(dá)均低于正常淋巴結(jié)，并且低表達(dá)程度很可能能夠反應(yīng)淋巴瘤的惡性度，RasGRP4在彌漫大B淋巴瘤中的表達(dá)明顯高于正常淋巴結(jié)組織，并且BCMA及RasGRP4分子均在淋巴瘤

12、細(xì)胞的惡性增殖及抗凋亡機(jī)制中起重要作用。
　　第三部分 18F-FDG PET-CT的SUVmax與淋巴瘤BCMA及RasGRP4分子表達(dá)的相關(guān)性研究
　　目的：
　　探索淋巴瘤BCMA及RasGRP4分子表達(dá)與PET-CT常用指標(biāo)SUVmax之間的相關(guān)性，為開發(fā)淋巴瘤相關(guān)影像診斷分子探針打下基礎(chǔ)。
　　方法：
　　收集經(jīng)病理確診的彌漫大B淋巴瘤14例，在相同的條件下分別免疫組化染色BCMA分子及RasGR

13、P4分子，表達(dá)量通過mage Pro Plus6.0軟件統(tǒng)計累積光密度(Integrated option density，IOD)進(jìn)行半定量分析。所有納入病例均在相同的掃描條件及參數(shù)設(shè)置下完成掃描的PET-CT圖像，由2名經(jīng)驗豐富的醫(yī)師分別單獨(dú)對PET/CT圖像進(jìn)行分析，各自統(tǒng)計SUVmax值及臨床基本信息，通過統(tǒng)計分析，分別探究BCMA及RasGRP4分子表達(dá)量與該淋巴瘤病人PET-CT的SUVmax值之間的相關(guān)性。
　　結(jié)果

14、：
　　共納入14例彌漫大B淋巴瘤病人，其中9例女性，5例男性，平均年齡為63歲，其中，9例病例的PET-CT掃描成像的標(biāo)準(zhǔn)攝取值(SUV)最高處位于淋巴結(jié)病灶，其余5例發(fā)生在腦、額竇、扁桃體、胸椎及縱膈。納入病例的SUVmax值最大為51，位于扁桃體彌漫大B淋巴瘤病灶，最小為12.3，位于淋巴結(jié)淋巴瘤病灶，平均SUVmax值為22.4。BCMA免疫組化平均累計IOD未發(fā)現(xiàn)與SUVmax間存在明確的負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=0.0867，p