巖黃連生物堿類化學(xué)成分及其抗腫瘤活性研究.pdf

1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文巖黃連生物堿類化學(xué)成分及其抗腫瘤活性研究姓名：程軒軒申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：生藥學(xué)指導(dǎo)教師：楊得坡20080606中山大學(xué)博士學(xué)位論文1 巖黃連的生物堿類成分研究采用傳統(tǒng)的提取分離手段：正相、反相柱層析、凝膠過濾層析等方法，對巖黃連中的化學(xué)成分進(jìn)行了較系統(tǒng)的分離純化，從巖黃連全草的乙醇提取物中分離得到2 5 個化合物，經(jīng)光譜( U V 、I R 、1 H ．N M R 、1 3 C 挑很、M S 等) 和化學(xué)方法鑒定

2、了其中2 1 個生物堿的結(jié)構(gòu)，其中佗m 1 0 y l a g I m t i l l e 為雙子葉植物中首次得到的化合物，c a n a d k 、d e h y d r o d i S C r e t 鋤沁、s 哪渤r 沁、c o 帥a l l k 、p a l l i d m為該種植物中首次得到的化合物。2 高速逆流色譜法制備巖黃連中的生物堿采用高速逆流色譜法( h i g h ．s p e e dc o u 1 1 ：t e r

3、 C o u 玎e mc h r o m a t o g r 印h y ，H S C C C )進(jìn)行巖黃連化學(xué)成分的制備分離。該法避免了傳統(tǒng)的柱層析分離方法耗時較長、步驟繁多，損失樣品，得率較低的缺點。本研究選擇生物堿富集的正丁醇萃取物作為樣品，先后經(jīng)過四次H S C C C 分離，得到單體化合物s C o u l e r k 、i S o c o 州i 1 1 e 、d e h y d r o c h e i l a n t h i

4、硒l i n e 、d e h y d r o c a V i d i r l e 、p a l m a t i l l e 、b e r b e r i I l e 。從實驗結(jié)果來看，高速逆流色譜法( H S C C C ) 節(jié)約時間、節(jié)省溶劑，基本上實現(xiàn)了短時間內(nèi)高純度、高得率產(chǎn)品的制備。3 巖黃連的抗腫瘤藥理活性篩選本部分研究包括兩方面內(nèi)容：細(xì)胞毒性和D N A 拓?fù)洚悩?gòu)酶I 抑制活性篩選。在細(xì)胞毒性篩選試驗中，采用M T T 法

5、檢測從巖黃連中分離得到的2 1 種生物堿對S 1 8 0 、H e p G 2 、A 5 4 9 、C a c o ．2 四個腫瘤細(xì)胞株增殖的抑制作用。實驗結(jié)果表明，巖黃連中的生物堿對上述四個腫瘤細(xì)胞株均具有不同程度的抑制作用，其中又以對S 1 8 0 和H 印G 2 細(xì)胞增殖的抑制較為顯著。經(jīng)過比較發(fā)現(xiàn)，巖黃連中水溶性季銨堿對腫瘤細(xì)胞的抑制活性顯著高于脂溶性叔胺堿。因而預(yù)示了水溶性化合物是巖黃連抑制腫瘤細(xì)胞增殖的主要活性成分。在抗D