DEHP急性暴露誘導的肝臟毒性及枸杞多糖和枸杞汁的干預作用.pdf

1、本研究采用染毒前干預和染毒后干預兩種方式探討了枸杞多糖（LBP）、枸杞汁對鄰苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）毒性的干預效果。染毒前干預采用40只 SD雄性大鼠，隨機分為5組：對照組、DEHP染毒組、LBP低、中、高干預組，每組8只。DEHP染毒劑量為2000 mg/kg.bw，干預劑量分別為50、100、200 mg/kg.bw。先給實驗動物用LBP干預6天，再在第7天干預的同時用DEHP染毒，末次灌胃24小時后處死；染毒后干預采

2、用80只SD雄性大鼠，隨機分為4組：對照組、DEHP染毒組、LBP干預組、枸杞汁干預組，每組20只。DEHP染毒劑量為3000 mg/kg.bw，LBP干預劑量為200 mg/kg.bw、枸杞汁干預劑量為8 ml/kg.bw。在第1天干預的同時用DEHP一次染毒，再分別用LBP和枸杞汁干預6天，在染毒后的第1、3、5和7天隨機處死5只大鼠。觀察DEHP急性暴露對大鼠肝代謝酶、上游調節(jié)因子和氧化應激的影響，以及LBP和枸杞汁的干預作用，具

3、體結果如下：
　?。?）染毒前干預實驗
　　DEHP染毒使大鼠肝臟系數(shù)下降（P<0.05），LBP干預能上調染毒大鼠的肝臟系數(shù)。DEHP染毒使大鼠肝臟的Ⅰ相代謝酶CYP2E1活性降低（P<0.01）、CYP3A1活性降低（P<0.01）、CYP1A1活性呈降低趨勢，Ⅱ相代謝酶 GSTpi活性降低（P<0.05）、UGT1活性降低（P<0.05），LBP高劑量干預組能上調染毒大鼠的Ⅰ相代謝酶CYP2E1活性（P<0.01）、C

4、YP3A1活性（P<0.05）和 CYP1A1活性，上調染毒大鼠的Ⅱ相代謝酶GSTpi活性（P<0.05）和UGT1活性（P<0.05）。LBP干預能降低染毒大鼠血清中MEHP的含量，增加MEHP和PA在尿液中的排出。
　　DEHP染毒24小時后使大鼠Ⅰ相和Ⅱ相代謝酶活性下降，LBP干預能上調Ⅰ相和Ⅱ相代謝酶活性；DEHP染毒后PXR活性的下降可能是使得Ⅰ相和Ⅱ相代謝酶活性下降的原因，LBP干預后通過升高 PXR活性來上調Ⅰ相和Ⅱ

5、相代謝酶活性，并使染毒大鼠的中間代謝產物MEHP在血液中的含量降低，加快MEHP和PA在尿液中的排出，產生了干預效應。
　　（2）染毒后干預實驗
　?、偃径竞蟾深A對大鼠的一般毒性的影響：DEHP染毒使大鼠肝臟系數(shù)在染毒第1至第5天高于正常水平（第1天，P<0.01；第3天，P<0.01）后趨近于正常水平，睪丸系數(shù)在染毒第1至第5天低于正常水平（第3天，P<0.05；第5天，P<0.05）后趨近于正常水平，LBP干預能下調染毒

6、大鼠的肝臟系數(shù)，枸杞汁干預能下調染毒大鼠的肝臟系數(shù)（第3天，P<0.01）并上調其睪丸系數(shù)。
　?、谌径竞蟾深A對大鼠氧化損傷的影響：DEHP染毒使大鼠血清的SOD活性在染毒第1至第3天降低（第3天，P<0.01）后接近于正常水平，GSH-Px活性在染毒第1至第3天降低（第3天，P<0.05）后接近于正常水平，LBP和枸杞汁干預能升高染毒大鼠血清的SOD和GSH-Px活性（第3天，P<0.01）。LBP和枸杞汁干預能升高染毒大鼠血清

7、的SOD和GSH-Px活性，降低MDA水平。DEHP染毒使大鼠肝臟SOD高于正常水平（第3、第5、第7天，P<0.01），GSH-Px活性高于正常水平（第1、第3天，P<0.05），MDA水平在染毒第1至第5天維持在正常范圍，第7天極顯著升高（P<0.01）；枸杞汁干預能使染毒大鼠的SOD活性降低（第3、第5天，P<0.01），GSH-Px活性降低（第3天，P<0.01；第5天，P<0.05），MDA水平降低（第3天，P<0.01；第7

8、天，P<0.05），LBP干預使染毒大鼠的SOD和GSH-Px活性進一步增強，MDA水平有降低，但與DEHP組比較均無顯著性差異。
　　③染毒后干預對大鼠的肝代謝酶的影響：DEHP染毒使肝胞液 GST活性上升（P<0.05），肝微粒體GSTpi和UGT1活性在第1天下降，枸杞汁干預后在第5天顯著升高了染毒大鼠的UGT1（P<0.05）。
　?、苋径竞蟾深A對大鼠的上游調節(jié)因子的影響：DEHP染毒使大鼠肝臟的PXR活性在第3至5

9、天顯著升高（P<0.05或P<0.01），第7天呈下降趨勢；LBP干預后第1天和第3天PXR活性顯著升高（P<0.05），第5至7天呈下降趨勢；枸杞汁干預后PXR活性一直呈下降趨勢，染毒后第5天顯著低于染毒組大鼠的PXR活性（P<0.05），但與對照組無顯著性差異。
　?、萑径竞蟾深A對大鼠的DEHP代謝的影響：DEHP染毒后大鼠血清MEHP的含量隨時間延長而下降，第7天后無MEHP檢出；LBP干預后能降低MEHP在血清中的含量，第

10、5天后無MEHP檢出；枸杞汁干預后也能降低MEHP在血清中的含量，第3天后無MEHP檢出。DEHP染毒后大鼠尿液MEHP的排泄率隨時間延長而下降；LBP和枸杞汁干預后能增加尿液MEHP排泄率；DEHP染毒后大鼠尿液PA的排泄率隨時間延長而下降；LBP和枸杞汁干預后能增加尿液PA的排泄率。
　　DEHP染毒使大鼠GST活性升高，PXR活性后期升高，并引起大鼠血清SOD和GSH-px活性在第3天出現(xiàn)顯著下降，MDA水平升高，造成氧化損