CREB3L1和PTN在人腦膠質瘤中的表達及臨床意義.pdf

1、目的:人腦膠質細胞瘤，簡稱腦膠質瘤(glioma of brain)，是發(fā)生于神經外胚層組織的腫瘤，故亦稱神經外胚層腫瘤或神經上皮腫瘤。膠質瘤占顱內腫瘤40％～50％，由于其惡性程度高并且呈浸潤性生長，所以導致手術難以全部切除，術后復發(fā)率高，總體預后不良，平均生存期為1年，術后放療和化療可延長生命，但是不能治愈。如何提高膠質瘤的治療效果，是神經外科最富挑戰(zhàn)性而又亟待解決的問題。神經膠質瘤的常規(guī)治療手段是手術切除加上放療和化療。近年來，免

2、疫治療、抗血管形成及基因治療等新療法也開始從實驗研究向臨床應用過渡。然而，任何單一的手段都難以達到真正的治愈，特別是廣泛浸潤性生長的惡性膠質瘤。因此，探索膠質瘤的發(fā)病機制，尋找新的治療手段，提高膠質瘤的治療效果已經迫不及待。
　　癌基因與抑癌基因的相互作用及細胞增殖與凋亡的平衡，決定了腫瘤生物學行為的發(fā)生與發(fā)展程度，目前研究較多的是CREB3L1和PTN在肺癌、胃癌、結腸癌、前列腺癌中的表達情況，而在人腦膠質瘤中的研究還比較少。C

3、REB3L1是近年來新發(fā)現(xiàn)的重要的轉錄因子，在內質網(wǎng)應激狀態(tài)下UPR通路被激活后CREB3L1形成效應片段進入細胞核，通過結合cAMP反應元件作用于目的基因，促進腫瘤細胞的凋亡，抑制細胞有絲分裂。CREB3L1目的基因主要包括細胞凋亡基因GADD153、c-JUN、caspase-3及細胞循環(huán)抑制因子p21、p27、p16。PTN是一種分泌性的肝素結合生長因子，可與跨膜蛋白酪氨酸磷酸酶受體(RPTPζ)、間變性淋巴瘤激酶受體(ALK)等

4、多種受體結合后，激活細胞骨架重構相關通路和細胞增殖、存活、抗凋亡相關通路，誘導腫瘤血管形成及過度增殖，進而促進腫瘤的發(fā)生與發(fā)展。腦膠質瘤是顱內最常見的腫瘤，深入了解腦膠質瘤中CREB3L1與PTN的表達及其與腦膠質瘤臨床病理分型之間的關系，可能為腦膠質瘤的診斷、治療、預后提供一條新途徑。
　　通過免疫組織化學染色方法(IHC)和實時熒光定量逆轉錄聚合酶鏈反應(qRT-PCR)方法對正常腦組織和不同級別膠質瘤組織中CREB3L1和P

5、TN的表達進行檢測，探討CREB3L1和PTN在膠質瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用及其與臨床病理分型之間的關系，從而為膠質瘤的診斷、治療提供線索及依據(jù)。
　　方法:收集于河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院神經外科2014年2月至2014年6月期間行手術切除的人腦膠質瘤標本42例，按照WHO2007年中樞神經系統(tǒng)腫瘤分類:Ⅰ～Ⅱ級為低級別膠質瘤，共17例，Ⅲ～Ⅳ級為高級別膠質瘤，共25例，均經本院病理科證實并且有完整病歷資料，另取9例因腦外傷或者腦出血而行

6、顱內減壓手術的正常人腦組織標本作為對照，膠質瘤患者于手術前均未接受放化療等抗腫瘤治療。每一個標本均在手術切除后立即置于10％福爾馬林中固定和液氮中保存，采用免疫組織化學法(IHC)和qRT-PCR法分別測定CREB3L1及PTN的蛋白和mRNA在膠質瘤和正常腦組織中的表達水平，免疫組化結果采用免疫積分打分法IRS（即染色強度和陽性細胞百分比乘積）進行統(tǒng)計，qRT-PCR原始檢測結果按照2-△△ct相對定量進行統(tǒng)計。用統(tǒng)計軟件SPSS13

7、.0對實驗所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。
　　結果:
　　1、免疫組化結果顯示:CREB3L1在正常腦組織和低、高級別膠質瘤三組間表達差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，陽性率分別為100％、76％、40％，低級別膠質瘤組中CREB3L1表達水平顯著低于正常腦組織組(P＜0.05)，高級別膠質瘤組中CREB3L1表達水平顯著低于低級別膠質瘤組與正常腦組織組(P＜0.05); PTN在三組間表達差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，陽性率分

8、別為11％、82％、100％，低級別膠質瘤組中PTN表達水平顯著高于正常腦組織組(P＜0.05)，高級別膠質瘤組中PTN表達水平顯著高于低級別膠質瘤組與正常腦組織組(P＜0.05)。CREB3L1與PTN在正常腦組織、低級別和高級別膠質瘤三組表達呈負相關(r=-0.29，P=0.039)。
　　2、qRT-PCT結果顯示:CREB3L1 mRNA在正常腦組織和低、高級別膠質瘤三組間表達差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，低級別膠質瘤

9、組中CREB3L1 mRNA的表達水平顯著低于正常腦組織組(P＜0.05)，高級別膠質瘤組中CREB3L1 mRNA的表達水平顯著低于低級別膠質瘤組與正常腦組織組(P＜0.05); PTN mRNA在三組間表達差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，低級別膠質瘤組中PTN mRNA的表達水平顯著高于正常腦組織組(P＜0.05)，高級別膠質瘤組中PTN mRNA的表達水平顯著高于低級別膠質瘤組與正常腦組織組(P＜0.05)。CREB3L1 mR

10、NA與PTN mRNA在正常腦組織、低級別和高級別膠質瘤三組表達呈負相關(r=-0.497，P=0.000)。
　　結論:
　　1、CREB3L1的表達水平與膠質瘤的惡性級別呈負相關，CREB3L1的表達下調與膠質瘤的惡性進演關系密切。
　　2、PTN的表達水平與膠質瘤的惡性級別呈正相關，PTN的表達上調與膠質瘤的腫瘤生物學行為關系緊密。
　　3、CREB3L1和PTN可能成為膠質瘤的生物學指標及靶向治療的新方向